DB37_T 1679-2010家畜尿液中莱克多巴胺的快速测定 检测卡法.pdf

ICS 65. 020. 30B 42DB37山東东省地方标准DB 37/T畜尿液中莱克多巴胺的快速测定检测卡法Rapid determination of ractopamine in livestock urine Test strip2010-10-19发布2010-11-01实施山东省质量技术监督局发布 DB37/ T次前言II范围2规范性引用文件3原理4试剂和材料5仪器6样品6. 1样品的采集6. 2样品的保存6.3样品的处理检测卡的验证7. 1阴性样品验证7. 2阳性样品验证7. 3检测卡的综合评价8分析步骤9结果判定9. 1检测卡无效9. 2阳性反应9. 3阴性反应10结果确认与表述10. 1呈现阳性反应的样品10. 2呈现朗性反应的样品附录A（规范性附录）菜克多巴胶检测卡判定示意图 DB37/ T 言本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草。本标准由山东省畜牧兽医局提出。本标准由畜牧业专业标准化技术委员会归口。本标准起草单位：山东省饲料质量检验所。本标准起草人：孟凡胜、宫玲玲、李会荣、刘继明、李德钊。II DB37/ T 1679—2010家畜尿液中莱克多巴胺的快速测定检测卡法1范围本标准规定了，用检测卡快速测定家畜尿液中莱克多巴胺的方法。本标准适用于家畜尿液。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件，凡是不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本（包括所有的修改单）适用于本文件，NY/T763猪肉、猪肝、猪尿抽样方法3原理将莱克多巴胺和莱克多巴胺抗体分别包被在检测卡纤维素膜的不同带区；滴加在膜条一端的样液在性.4试剂和材料4. 1克多巴胺标准储备液：准确称取50g莱克多巴胺标准品（含量≥98%），用甲醇（分析纯）落解并定容至50mL，该落液浓度为1.0mg/mL。4℃冰箱中忙存，有效期6个月。4.2莱克多巴胺标准工作液：准确移取50μL莱克多巴胺标准储备溶液（4.1），用甲醇（分析纯）稀释并定容至50ml，该溶液浓度为1.0μg/mL.4℃冰箱中贮存，有效期1个月。4.3一次性纸杯：100mL.4.4一次性滴管。4.5检测卡。4.6莱克多巴胺阴性样品：采集确认未饲喂菜克多巴胺的家畜尿液或经质谱法确证不含莱克多巴胺的家畜尿液。2℃~8℃冷藏保存。5仪器5.1离心机：转速3000r/min以上。5.2离心管：1.5ml5.3移液枪：1000 μ L,100μL。6样品 DB37/ T 1679—20106.1样品的采集猪尿液样品：按NY/T763标准用干燥、洁净的一次性纸杯（4.3)采集尿液，其他动物尿液样品：参照NY/T763标准用干煤、洁净的一次性纸杯(4.3)采集尿液。6.2样品的保存如果不立即检测，宜在2℃～8℃冷藏保存。6.3样品的处理澄清尿液样品不需要处理：浑浊的尿液样品，用离心机（5.1）离心10in后取上清液备用7检测卡的验证7. 1阴性样品验证每一批次按5%的比例抽取检测卡，最少抽取一个，使用阴性样品（4.6）依检测卡说明书测定步做阴性验证试验。如果有一个及以上检测卡不符合时，在同一批次内加倍随机抽取检测卡做阴性验证试验。再次抽取检测卡的验证试验应全部符合。7.2阳性样品验证用移液枪（5.3）移取阴性样品（4.6）900μL于离心管（5.2）内，加入菜克多巴胺标准工作液（4.2）100口L，充分混合，该尿落中莱克多巴胺的浓度为100ng/mL，用此尿液接说明书标识的检测限，配制成含莱克多巴胺与检测限相同的样品。每一批次按10%的比例抽取检测卡，最少抽取两个检测卡，使用该样品依检测卡说明书测定步骤做阳性验证试验，如果有一个及以上检测卡不符合时，在同一批次内加倍随机抽取检测卡做阳性验证试验再次抽取检测卡的验证试验应全部符合。7.3检测卡的综合评价在确认阴性验证试验和阳性验证试验同时符合时，该批次的检测卡方可使用，8分析步薪检测卡（4.5）放置于水平台面上恢复至检测卡要求的温度后，取出检测卡进行检测。检测卡即开即用。用一次性滴管（4.4）吸取尿液样品，垂直滴加34滴于检测卡(4.5)样孔内。在加液过程中勿使样品溶液溢出加样孔。加样后开始计时，在5min~10min内判读结果。注：不同品牌的检测卡其测定步限略有差别，使用不同品牌检测卡时，分析步疆根帮检测卡的说明书进行，9结果判定9.1检测卡无效检测卡的质控区C线未显示红色条带（见附录A中图A.1），此情况下，应用新的检测卡重新测定，9.2阳性反应2 DB37/ T 1679—2010检测卡的质控区C线显示一条红色条带，测试区T线未出现红色条带（见附录A中图A.2）9.3阴性反应检测卡的质控区C线出现一条红色条带，测试区T线显