CN201410561126.6-一种检测心肌肌钙蛋白的免疫层析荧光试剂条及制备方法[ZH].PDFVIP

(19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 (10)申请公布号CN 104237537 A (10)申请公布号 CN 104237537 A (43)申请公布 日 2014.12.24 (21)申请号 201410561126.6 (22)申请 日 2014.10.21 (71)申请人 南京基蛋生物科技有限公司 地址 211505 江苏省南京市六合区沿江工业 开发区博富路9 号 (72)发明人 金晶 杜腾飞 黄力 苏恩本 王勇 陈伟 (51) Int.C l. G01N 33/68 (2006.01) 权利要求书1页 说明书3页 附图1页 权利要求书1 页 说明书3 页 附图1 页 (54) 发明名称 一种检测心肌肌钙蛋白的免疫层析荧光试剂 条及制备方法 (57) 摘要 本发明公开了一种检测心肌肌钙蛋白的免疫 层析荧光试剂条及制备方法，属于临床医学检测 领域。该试剂条包括底板、样品垫、示踪粒子结合 垫、硝酸纤维素膜和吸水垫；所述样品垫、示踪粒 子结合垫、硝酸纤维素膜和吸水垫水平方向顺序 连接固定于底板上。所述示踪粒子结合垫上设有 包被在纳米金属粒子表面的cTnI单克隆抗体- 荧 光颗粒复合物吸附层 ；所述的硝酸纤维素膜上设 置有cTnI 单克隆抗体或多克隆抗体捕获分子构 成的检测线和兔抗鼠IgG 抗体构成的质控线。本 发明利用纳米金属粒子提高荧光强度的原理，检 测时间短、特异性和灵敏度高、检测结果更加准 确。 A A 7 7 3 3 5 5 7 7 3 3 2 2 4 4 0 0 1 1 N N C C CN 104237537 A 权 利 要 求 书 1/1 页 1. 一种检测心肌肌钙蛋白的免疫层析荧光试剂条，包括底板（1），其特征在于还包括 样品垫（2）、示踪粒子结合垫（3）、硝酸纤维素膜（4）和吸水垫（5）；所述样品垫（2）、示踪粒 子结合垫（3）、硝酸纤维素膜（4）和吸水垫（5），水平方向顺序连接并固定于底板（1）上；所 述示踪粒子结合垫（3）设有包被在纳米金属粒子表面的cTnI单克隆抗体/ 多克隆抗体- 荧 光颗粒复合物吸附层 ；所述的硝酸纤维素膜（4）上设置有cTnI 单克隆抗体或多克隆抗体捕 获分子构成的检测线（6）和兔抗鼠IgG 抗体构成的质控线（7）。 2. 根据权利要求1 所述的一种检测心肌肌钙蛋白的免疫层析荧光试剂条，其特征在 于所述的纳米金属粒子选自纳米金颗粒、纳米银颗粒、金纳米棒或复合纳米粒子，粒径为 50~200nm，包被的抗体厚度为10~30nm。 3. 根据权利要求1 所述的一种检测心肌肌钙蛋白的免疫层析荧光试剂条，其特征在于 所述荧光颗粒选自荧光素cy5、荧光素cy7、羧基荧光素、2- 甲氧基荧光增强素、罗丹明、藻 红蛋白中的一种。 4. 一种权利要求1 所述的免疫层析荧光试剂条的制备方法，其特征在于包括以下步 骤 ： 1）样品垫的制备：样品垫选用玻璃纤维或聚酯材料，用缓冲液（PBS，Tris 或甘氨酸等） 等溶解5mg/ml 的蛋白（BSA，酪蛋白等），然后加入少量的表面活性剂（Tween20 等），调节pH 到6~8，将璃纤维或聚酯材料置于浸泡2 ～ 4 小时，取出后25℃干燥8 小时可得； 2）示踪粒子结合垫的制备：将处理好的结合垫上均匀的喷上示踪粒子标记抗体/ 抗 原标记物，置于25℃干燥4 小时即可得，示踪粒子制备可分抗体IgG- 荧光素的制备和金属 粒子- 抗体- 荧光复合物的制备两步； A．抗体IgG- 荧光素的制备