CN201210383644.4-微量白蛋白荧光免疫定量检测试剂盒及其制备方法[ZH].PDFVIP

(19)中华人民共和国国家知识产权局 *CN102879586A* (12)发明专利申请 (10)申请公布号 CN 102879586 A (43)申请公布 日 2013.01.16 (21)申请号 201210383644.4 (22)申请 日 2012.10.11 (71)申请人 南京基蛋生物科技有限公司 地址 211505 江苏省南京市六合区沿江工业 开发区博富路9 号 (72)发明人 苏恩本 王勇 陈伟 黄力 (51) Int.C l. G01N 33/68 (2006.01) G01N 33/533 (2006.01) 权利要求书 1 页 说明书 5 页 附图 2 页 权利要求书1 页 说明书5 页 附图2 页 (54) 发明名称 微量白蛋白荧光免疫定量检测试剂盒及其制 备方法 (57) 摘要 本发明涉及一种微量白蛋白荧光免疫定量检 测试剂盒及其制备方法，定量检测试剂盒的底衬 上依次搭接地粘贴样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜 和吸水纸，所述的结合垫上包被有荧光胶乳微球 标记的人白蛋白抗体，所述的硝酸纤维素膜上包 被有白蛋白重组抗原的检测线和兔抗鼠IgG 抗体 的质控线。本发明能够准确定量检测人尿液中微 量白蛋白含量，具有操作简便、准确度高、灵敏度 高、成本低等特点。 A 6 8 5 9 7 8 2 0 1 N C CN 102879586 A 权 利 要 求 书 1/1 页 1. 一种微量白蛋白荧光免疫定量检测试剂盒，在底衬（1）上依次搭接地粘贴样品垫 （2）、结合垫（3）、硝酸纤维素膜（4）和吸水纸（5），其特征在于所述的结合垫（3）上包被有荧 光胶乳微球标记的人白蛋白抗体，所述的硝酸纤维素膜（4）上包被有白蛋白重组抗原的检 测线（6）和兔抗鼠IgG 抗体的质控线（7）。 2. 根据权利要求1 所述微量白蛋白荧光免疫定量检测试剂盒，其特征在于所述胶乳微 球粒径范围为50nm-500nm。 3. 根据权利要求2 所述微量白蛋白荧光免疫定量检测试剂盒，其特征在于所述胶乳微 球粒径为153nm。 4. 根据权利要求1 所述微量白蛋白荧光免疫定量检测试剂盒，其特征在于所述荧光胶 乳微球是由胶乳微球吸附荧光标记的链霉亲和素制备得到。 5. 根据权利要求1 所述的微量白蛋白荧光免疫定量检测试剂盒，其特征在于所述荧光 胶乳微球的荧光为直接荧光物质。 6. 根据权利要求5 所述微量白蛋白荧光免疫定量检测试剂盒，其特征在于所述直接荧 光物质为异硫氰酸荧光素、四乙基罗丹明、四甲基异硫氰酸罗丹明、荧光素Cy5、荧光素Cy7 中的一种。 7. 根据权利要求1 所述的微量白蛋白荧光免疫定量检测试剂盒，其特征在于所述结合 垫（3）材质为玻璃纤维素膜或聚酯膜。 8. 一种如权利要求1 所述一种微量白蛋白荧光免疫定量检测试剂盒的制备方法，包括 如下步骤 ： 1) 包被荧光胶乳微球标记人白蛋白抗体结合垫的制备： 将荧光标记的链霉亲和素和胶乳微球吸附结合，制备得到荧光胶乳微球 ； 将生物素与人白蛋白单克隆抗体结合，制备得到生物素化白蛋白抗体； 将所得荧光胶乳微球和生物素化白蛋白抗体混合，即得荧光胶乳微球标记人白蛋白抗 体； 将所得荧光胶乳微球标记人白蛋白抗体喷涂在结合垫上； 2) 硝酸纤维素膜的制备： 用包被缓冲液分别稀释白蛋白重组抗原和兔抗鼠IgG 抗体，并将稀释后的白蛋白重组 抗原和兔抗鼠IgG 抗体分别平行地喷于硝酸纤维素膜上形成白蛋白检测线和兔抗鼠IgG 抗 体质控线； 3）在底衬上顺次相互搭接地粘贴样品