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实验一薄层色谱和纸色谱第1页/共15页 实验一 纸色谱和薄层色谱第2页/共15页 实验目的学习色谱法的原理掌握使用薄层色谱和纸色谱对化合物进行分离和鉴定第3页/共15页 色谱法的一般原理利用混合物各组分在固定相和流动相中的分配平衡常数的差异进行分离。当带有样品的流动相流经固定相时，由于固定相对各组分的吸附或溶解性能的不同，使吸附力较弱获溶解度较小的组分在固定相中移动速度较快，经过多次反复平衡，将混合物中各组分分离。第4页/共15页 薄层色谱薄层色谱：薄层色谱（Thin Layer Chromatography），常用TLC表示，是一种微量，快速和简便的色谱方法。一般是将固定相，如硅胶和三氧化铝，负载在一张薄层板上，将样品置于固定相之后，流动相通过毛细管效应从下往上流动而使样品分开。TLC是有机化学实验室中使用的非常多实验操作，常常用来检测反应和柱色谱前判断使用展开剂的极性。第5页/共15页 薄层色谱实验药品和仪器药品： 偶氮苯，苏丹红，混合物（自配），环己烷/乙酸乙酯 9:1仪器：TLC板，毛细管，广口瓶，铅笔第6页/共15页 0.5cm0.5 cm1. 准备TLC板第7页/共15页 2. 展开展开剂：环己烷/乙酸乙酯 9:1第8页/共15页 3. 干燥、显色 自身有颜色有共轭体系的使用紫外灯 各种显色剂第9页/共15页 4. 计算Rf值Rf = D1/D2第10页/共15页 5. 分析结果通过比较Rf值，确定混合物中各组分分别是什么物质第11页/共15页 纸色谱纸色谱（Paper Chromatography）：纸色谱法是以纸作为载体的色谱法。按分离原理属于分配色谱法的范畴。固定相一般为滤纸纤维上吸附的水分，流动相(展开剂)为有机溶剂。由于滤纸纤维的毛细管现象，溶剂在含水的滤纸上缓慢上升，流动相各组分在滤纸上受两相溶剂的影响，产生分配现象，亲脂性强的流动相中分配的多，移动速度快。第12页/共15页 纸色谱实验药品和仪器药品：甘氨酸，亮氨酸，混合物（自配），展开剂（水/正丁醇/醋酸 5:4:1，取上层液体）仪器：滤纸，大试管，带钩塞子，铅笔第13页/共15页 实验操作类似于TLC展开装置图 两张色谱滤纸，分别点上甘氨酸， 混合物，以及亮氨酸，混合物 使用茚三酮乙醇溶液进行显色 通过比较Rf值确定混合物中各 组分。第14页/共15页 感谢您的欣赏第15页/共15页
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