一种植物双靶点CRISPR/Cas9载体及其构建方法和应用.pdfVIP

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2023-06-22 发布于四川
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一种植物双靶点CRISPR/Cas9载体及其构建方法和应用.pdf

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本发明公开了一种植物双靶点CRISPR/Cas9载体及其构建方法和应用，首先得到串联两个sgRNA表达框的中间载体；然后得到pBI121‑MCS‑Cas9；再设计包含两条sgRNA的引物，以所述中间载体为模板进行PCR；最后通过同源重组把PCR产物连入pBI121‑MCS‑Cas9中。通过上述制备方法可制备得到所述植物双靶点CRISPR/Cas9载体，以pBI121载体为骨架载体，依次连接有sgRNA表达框1、sgRNA表达框2和Cas9表达框。本发明的方法提高了双靶点CRISPR/Cas9载体

(19)国家知识产权局 (12)发明专利 (10)授权公告号 CN 113388635 B (45)授权公告日 2022.08.19 (21)申请号 202110770783.1 C12N 15/113 (2010.01)