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xb四植物组织与细胞培养;第2页/共72页;所采用技术的理论基础 ;第一节　植物细胞工程概述 第二节　植物组织与器官培养 第三节　植物细胞培养 第四节　原生质体培养和体细胞杂交;第一节　植物细胞工程概述 一　植物细胞工程的定义 二　植物细胞工程的内容 三　存在的理论与生产问题 四　植物组织培养与细胞培养的区别 五　植物细胞与组织培养技术内容与分类;一、植物细胞工程（plant cell engineering）的定义： 　　是在植物细胞全能性的基础上，以植物细胞为基本单位，在体外条件下进行培养、繁殖或人为的精细操作，使细胞的某些生物学特性按照人们的意愿发生改变，从而改良品种或创制新种，或加速繁殖植物个体，或获得有用产物的过程。;二、 植物细胞工程的内容：;三、存在的理论与生产问题 ;四、植物组织培养与细胞培养的区别 ;五、植物细胞与组织培养技术内容与分类： ;;第二节　植物组织与器官培养一、植物细胞的全能性 二、植物组织与器官培养;1.定义： 生物体的细胞具有使后代细胞形成完整个体的潜能的特性。 2. 原理： 　　生物体的每一个细胞都包含有该物种所特有的全套遗传物质，都有发育成为完整个体所必需的全部基因，从理论上讲，生物体的每一个活细胞都应该具有全能性。 3. 差异： 　　植物细胞全能性＞动物细胞全能性 　　在植物细胞中 　　受精卵＞生殖细胞＞具有分化能力的细胞＞成熟的体细胞;在生物体内，细胞没有表现出全能性，而是分化为不同的组织、器官，是因为： ; 科学研究表明，处于离体状态的植物活细胞，在一定的营养物质、激素和其他外界条件的作用下，就可能表现出全能性，发育成完整的植株。人工条件下实现的这一过程，就是植物组织培养。 ;二、植物组织与器官培养;1. 定义： 　　植物组织与器官培养——是指在无菌条件下，将离体的植物器官（如根尖、茎尖、叶、花、未成熟的果实、种子等）、组织（如花药组织、胚乳、皮层等）、细胞（体细胞、生殖细胞等）、胚胎（如成熟和未成熟的胚）、原生质体等培养在人工配置的培养基上，给予适当的培养条件，诱???产生愈伤组织、潜伏芽，或者长成新的完整植株的一种实验技术。;细胞离体、一定的营养物质、激素和其他外界条件;无机成分：N，P，K， S，Ca，Mg等大量元素及部分微量元素 碳源：2%～5%的蔗糖 维生素：B族，Vc；0.1～10mg/L 植物生长物质：生长素类，细胞分裂素类 有机附加物：如水解酪蛋白（CH）、酵母提取物（YE）、麦芽提取物（ME）和椰子乳（CM）等;3. 发展历程： ;4. 几个概念 ;再分化（redifferentiation）：指原已分化的细胞过脱分化后再次分化的现象，最终可进一步形成完整的小植株。 继代培养（subculture）：是指愈伤组织在培养基上生长一段时间后，营养物枯竭，水分散失，并已积累了一些代谢产物，此时需要将这些组织转移到新的培养基上进行培养的方式。 胚状体（embryoid）：是在植物组织培养中起源于非合子细胞，经过胚胎发生和胚胎发育形成的胚状结构，其主要特征是有根、芽两极，和母体植物或外植体的维管组织无直接联系。 ;第23页/共72页;5. 植物组织培养基本步骤： ;植物材料的采集和取材;外植体的制备;外植体：从活植物体上切下进行培养的那部分组织或器官。 　外植体灭菌消毒（根尖、茎、芽、嫩叶、种子、花粉等）； 　用消毒过的器械将外植体置于培养皿上； 　切取所需的外植体； 　将外植体接种于培养容器的培养基上。 整个试验在超净工作台上进行，保持无菌！ 外植体经过一段时间在培养基上生长后，会形成愈伤组织。;接种;6. 愈伤组织培养的基本过程： ;愈伤组织的形成;愈伤组织的形成;第32页/共72页;第33页/共72页;试管苗的形成;试管苗;;培养室;移栽;第39页/共72页;试管苗大规模培养;实例：非洲紫罗兰的组织培养;植物组织培养过程;过程;7. 植物组织培养的应用;人工种子;人工种子;制作过程;细胞产物的工厂化生产;第三节　植物细胞培养 一　概述 二　植物细胞培养的培养基 三　植物细胞生物反应器大规模培养 四　植物细胞培养的应用;一、概述 1. 概念　　 　　植物细胞培养：是指在离体条件下，将愈伤组织或其他易分散的组织置于液体培养基中进行振荡培养，得到悬浮细胞，再通过继代培养使细胞增殖，从而获得大量细胞群体的技术。它是在组培基础上发展起来的。 ; 细胞培养的目的不是使细胞形成组织以致更多的植物体，而是通过大规模的细胞培养获得人类所需的细胞次生代谢产物。;2. 方法： ;根据培养对象;;二、植物细胞培养的培养基 无机盐类：如硝酸盐、铵盐 碳源：如蔗糖、葡萄糖 植物生长激素：主要是生长素和细胞分裂素 有机氮源：如某些蛋白质的水解产物，谷氨酰