NY_T 3938-2021CN 梨树腐烂病抗性鉴定技术规程.docx

ICS 65.020.01 CCS B 15 中 华 人 民 共 和 国 农 业 行 业 标 准 NY/T 3938—2021 梨树腐烂病抗性鉴定技术规程 Technical code of practice for identification of resistance to pear canker diseases 2021-11-09 发布 2022-05-01 实施 中华人民共和国农业农村部 发布 I NY/T 3938—2021 前 言 本文件按照GB/T1.1—2020 《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草。 本文件由农业农村部种植业管理司提出并归口。 本文件起草单位：中国农业科学院郑州果树研究所。 本文件主要起草人：周增强、王丽、侯珲、袁洪波、杨健。 NY/T 3938—2021 梨树腐烂病抗性鉴定技术规程 1 范围 本文件规定了梨树抗腐烂病鉴定的接种体制备、苗圃和梨苗的准备、田间人工接种、病情调查、抗性评 价及鉴定结果报告。 本文件适用于梨不同品种、育种资源、野生资源、杂交群体对腐烂病的抗性鉴定和评价。 2 规范性引用文件 本文件没有规范性引用文件。 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1 梨树腐烂病 Valsa canker of pear 由梨黑腐皮壳菌(Valsa pyri)(见附录A) 侵染导致枝干树皮腐烂的侵染性真菌病害。 3.2 病原分离物 pathogenic isolate 采用常规组织分离法从植物发病部位分离获得的病原菌的纯培养物。 3.3 接种菌饼 inoculated disk 用于人工接种的含有接种体的圆形培养基块状物。 3.4 病情级别 disease rating scale 人为界定植物个体或群体发病程度的数值化描述。 3.5 抗性评价 evaluation of resistant levels 根据采用的技术标准确定植物对特定病害抗感程度的描述 4 接种体制备 4.1 病原物分离 以常规组织分离法，从发病梨枝干的典型病斑的病健交界处分离并纯化梨树腐烂病病原菌。分离物 经形态学观察、分子鉴定和柯赫氏法则验证，确认为梨树腐烂病病原菌后，评价其致病性，选取致病力中等 菌株，于4℃下保存备用。 4.2 接种体繁殖 将4℃低温保存的梨树腐烂病病原菌菌种接种在PSA 培养基上，置于培养箱中26℃下培养4 d~ 5d. 用直径5 mm 打孔器沿菌落边缘打成菌饼备用。其中，PSA 培养基配方为：马铃薯200g,蔗糖20 g, 琼脂15 g～20 g,蒸馏水1000 mL。 5 苗圃和梨苗的准备 鉴定圃的设置：选择试验基地建立鉴定用，鉴定圃远离果园。人工接种鉴定设在温室1年～2年生盆 栽苗或假植苗中进行。温室温度控制在20℃~35℃,湿度控制在60%～80%。特殊情况下在苗间或田 2 NY/T 3938—2021 间成龄树等活体植株上，将待检材料嫁接，待嫁接材料长出45 cm～50 cm新梢后接种检测。按照常规方法 栽植梨苗，进行常规水肥管理。在试验期间， 一般不使用杀菌剂。确需防治有害生物，尽可能避开检测观察 期，首先选用保护性杀菌剂，要做好施药记录.记录药剂使用的种类、使用剂量、使用时期及施药方法等， 对照品种：鉴定中选择一个感病品种，要求高感梨树腐烂病且稳定性好，选择标准为在正常年份接种 后其病情指数达50.0或以上。 一般可选用“早红考密斯”品种或本地区的感病品种。 6 田间人工接种 接种实验设计：选取健康、长势一致当年生枝条或嫁接材料。枝条生长到45 cm～50 cm 时开始接 种，每枝条选取距基部10 cm 到距新梢顶部10 cm～15cm 枝段接种，每隔7 cm～10 cm 接种一个点。接 种区待检材料与对照品种随机排列或顺序排列，每小区接种20个点，重复3次。 接种方法：于当年8月～9月、翌年3月～4月共进行2次接种梨苗，接种前将需接种健康梨苗的枝条 表面用75%乙醇或0.5%次氯酸钠溶液消毒，再用直径5 mm 打孔器在枝条上每间隔7 cm～10cm 打孔， 孔深至木质部，每孔上各接一个梨腐烂病菌菌饼，再用脱脂棉沾无菌水缠绕，外用宽1 cm 左右的封11膜缠 绕保湿培养，以健康树枝条接种琼脂块为对照。调查时解开封口膜去除脱脂棉及接种体，做好标记。 7 病情调查 7.1 调查时间和方法 于每次接种后30 d, 调查每个接种点发病情况，记录病斑直径长度、枝条死亡状况。 7.2 病情级别划分 梨树腐烂病在梨树枝条上病斑直径长度及其相对应的分级标准见表1 表 1 梨树腐烂病在梨树枝条发病分级标准 单位为厘米 病情级别 严重度划分标准 0级 不发病 1级 病斑直径长度≤1.00 3级 1.00病斑