GA_T 1693-2020 法庭科学 DNA二代测序检验规范.docx

ICS 13.310 A 92 中华人民共和国公共安全行业标准 GA/T 1693—2020 法庭科学 DNA 二代测序检验规范 Forensic sciences—Specifications for second generation sequencing-based DNA examination 2020-10-30发布 2021-01-01 实施 中华人民共和国公安部 发 布 GA/T 1693—2020 目 次 前言 I 1 范 围 1 2 规范性引用文件 1 3 术语和定义 1 4 缩略语 3 5 总 则 3 6 原 理 4 7 检验器材和试剂 4 8 检验流程 4 9 数据分析 5 10 遗传参数计算 7 附录 A(资料性附录) 法庭科学DNA二代测序检验记录表 8 I GA/T 1693—2020 前 言 本标准按照 GB/T 1.1—2009 给出的规则起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。 本标准由全国刑事技术标准化技术委员会法医检验分技术委员会(SAC/TC 179/SC 6)提出并 归口。 本标准起草单位：公安部物证鉴定中心、四川大学、广东省公安厅。 本标准主要起草人：叶健、季安全、王乐、康克莱、侯一平、张驰、李海燕、刘开会、张广峰。 1 GA/T 1693—2020 法庭科学 DNA 二代测序检验规范 1 范围 本标准规定了利用二代测序技术进行法庭科学人类 DNA 遗传标记靶向测序检验的术语和定义、 原理、检验器材和试剂、检验流程，以及数据分析、遗传参数计算应遵守的基本要求。 本标准适用于针对各类法医学物证检材的 STR、SNP、InDel 等遗传标记以及线粒体 DNA 进行二 代测序检验分析，为法庭科学实践提供遗传学信息，适用于所有从事法庭科学检验的 DNA 实验室和产 品制造商。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本(包括所有的修改单)适用于本文件。 GB/T 27025—2019 检测和校准实验室能力的通用要求 GA/T 383—2014 法庭科学DNA 实验室检验规范 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1 DNA 测序 DNA sequencing 对DNA 分子的核苷酸排列顺序的测定，即测定组成核酸分子的腺嘌呤(A)、 鸟嘌呤(G)、胞嘧啶 (C)和胸腺嘧啶(T) 的排列顺序。 3.2 二代测序 second generation sequencing 区别于传统 Sanger(双脱氧法)测序，能够一次并行对大量核酸分子进行序列测定的技术，通常一 次测序反应能产出不低于100 Mb 的测序数据。 3.3 靶向测序 targeted sequencing 针对特定基因集或基因组区域内已知和新型变异进行测序，有效降低测序成本，提高测序深度，更 为有效地研究特定区域的遗传变异。 3.4 桥式 PCR bridge polymerase chain reaction 文库两端的 DNA 序列与芯片表面固定的引物序列特异性结合，以文库 DNA 为模板，进行桥形扩 增。通过不断变性和扩增的循环过程使得每个 DNA 片段在各自的位置上复制集中成束，生成 DNA 簇。每个DNA 簇包含成千上万单克隆扩增子，以每个DNA 单链为模板，逐个合成 DNA 互补链，将碱 基信号强度放大，进而达到测序所需信号的强度。 2 GA/T 1693—2020 3.5 乳化 PCR emulsion polymerase chain reaction 将用于PCR 反应的水相体系与油相体系混合，形成大量油包水的微乳液独立 PCR 反应空间，如果 PCR 反应体系中加入的核酸模板数量合适，每个独立反应空间中将只有一个模板分子。在形成的独立 反应空间中进行相同模板的平行扩增，即可得到大量相同的扩增结果，实现基因扩增。 3.6 DNA 纳米球 DNA nanoball 在二代测序的模板扩增过程中，先将 DNA 进行片段化处理，加接头序列和环化，形成单链环状 DNA, 然后通过滚环扩增将单链环状DNA 扩增2个～3个数量级最终产生的产物。 3.7 单次测序 single run sequencing 测序仪器运行一个测序流程，如一次单向测序或一次双向测序的行为。 [GB/T 30989—2014,定义3.20] 3.8 文库 library 通过生物来源的、人工合成的或克隆技术等所得到的一个重建分子群，如基因组文库、互补 DNA