GA_T 1979-2022CN 法庭科学 线粒体DNA二代测序技术规范.docx

ICS CCS 13.310 A 92 中华人民共和国公共安全行业标准 GA/T 1979—2022 法庭科学 线粒体 DNA 二代测序技术规范 Forensic sciences—Technical specifications for second generation sequencing for mitochondrial DNA 2022-03-09发布 2022-08-01 实施 中华人民共和国公安部 发 布 I GA/T 1979—2022 前 言 本文件按照 GB/T1.1—2020 《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。 本文件由公安部刑事侦查局提出。 本文件由全国刑事技术标准化技术委员会法医检验分技术委员会(SAC/TC 179/SC 6)归口。 本文件起草单位：辽宁省公安厅、大连市公安局、公安部物证鉴定中心、烟台市公安局、广州市公安 局、威海市公安局。 本文件主要起草人：刘锋、李明广、郑哲甲、季安全、王乐、于蛟、刘莉、李越、韩莹、王卫华。 GA/T 1979—2022 法庭科学 线粒体 DNA 二代测序技术规范 1 范围 本文件规定了法庭科学 DNA 实验室进行人类线粒体 DNA 二代测序检验的术语和定义、原理、检 验器材和试剂、检验流程、数据分析等应遵守的基本要求。 本文件适用于法庭科学 DNA 实验室针对各类法医学物证检材和样本进行线粒体 DNA 二代测序 检验分析，为法庭科学实践提供线粒体 DNA 遗传学信息。 2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文 件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本(包括所有的修改单)适用于 本文件。 GB/T 27025—2019 检测和校准实验室能力的通用要求 GB/T 30989—2014 高通量基因测序技术规程 GA/T 382—2014 法庭科学 DNA 实验室建设规范 GA/T 383—2014 法庭科学 DNA 实验室检验规范 GA/T 1161—2014 法庭科学 DNA 检验鉴定文书内容及格式 GA/T 1693—2020 法庭科学 DNA 二代测序检验规范 YY/T 1173—2010 聚合酶链反应分析仪 3 术语和定义 GB/T 30989—2014、GA/T 1693—2020 界定的以及下列术语和定义适用于本文件。 3.1 线粒体 DNA mitochondrial DNA;mtDNA 人类细胞核外 DNA, 独立存在于细胞质内，呈闭环双链结构，约有16569个碱基对；不遵循孟德尔 遗传定律，表现为母系遗传，通过卵细胞将其中的遗传信息传递给后代；无有丝分裂和减数分裂的周期 变化；遗传物质位于细胞器内，不受核移植的影响；单个细胞中mtDNA 拷贝数多，存在异质性现象。 3.2 异质性 heteroplasmy 当两种或两种以上的 mtDNA 序列存在于同一个细胞、组织或个体时称为异质性。 注：可分为长度异质性和点异质性，常见于以下两种情况：(1)同一个体在同一组织检出不同的 mtDNA 序列； (2)同一个体在不同的组织检出不同的 mtDNA 序列。 3.3 高变区 hypervariable region;HVR 位 于mtDNA 非编码区的 DNA 区域，突变率可达到单拷贝核基因组的6～17倍，且无修复系统、不 受选择压力的影响，积累了较多的变异，多态性好。 注：也称为控制区(control region),或者 D-环区(D-loop region),通常根据在mtDNA 链上的位置分为高变区 I 2 GA/T 1979—2022 (HVR-I,位于16024～16365 bp)、高变区Ⅱ(HVR-II,位于73～340 bp)和高变区Ⅲ(HVR-Ⅲ, 位于340~ 576 bp)。 3.4 修订的剑桥参考序列 revised cambridge reference sequence;rCRS 安德森于1981年在英国剑桥 Sanger实验室首次完成测定的人类mtDNA 序列(GenBank 登录号： M63933), 也被称为剑桥参考序列(cambridge reference sequence,CRS)。1999年，安德鲁斯等人对剑 桥参考序列所用的样本进行了重新测序，修正了最初公布序列中的11个碱基序列(GenBank 登录号： NC 012920. 1)。 3.5 二代测序 second generation sequencing 区别