CDDST癌症化疗药物敏感实验项目.pptxVIP

CDDST癌症化疗药物敏感实验项目第1页/共31页 2肿瘤个体化化疗简介第2页/共31页 3一、肿瘤个体化化疗简介2023/6/53资料显示：我国恶性肿瘤年发病例数为200万，死亡约150万，并以3％的速度递增且呈年轻化趋势，居各类疾病中死亡率之最第3页/共31页 4肿瘤治疗的三大手段手术治疗：局部治疗放射治疗（简称放疗）：局部治疗化学药物治疗（简称化疗）： 全身性治疗，近100种2023/6/54化疗药物：主要作用是阻止癌细胞增殖、浸润、转移直到最终杀灭癌组织。目前所使用的绝大多数化疗药物，主要是利用药物抑制细胞增殖和肿瘤生长效应发挥抗癌作用细胞毒作用（化疗药物副作用的根源）第4页/共31页 5长期以来，由于无法在治疗前判断不同肿瘤个体对药物的敏感性和耐药性，临床医生主要根据经验对患者进行治疗，具有相对的盲区。（培养成功率低、临床符合率低等）不正确的治疗不仅使患者遭受痛苦，身体状态严重受损，同时可诱导肿瘤细胞产生对多种药物的联合耐药，导致化疗失败（细胞毒作用）。因此，临床需要能在化疗前为患者筛选敏感性药物的检测技术，客观的针对不同个体选择和优化化疗药物（组合），实现肿瘤病人的个体化治疗。2023/6/55第5页/共31页 66个体化治疗（最适宜药物疗法）-药敏试验目前代表性体外药敏实验：MTT 、ATP-TCA、HDRA。不同程度地部分解决肿瘤个体化治疗的问题，但均存在所需细胞数量多，不能解决小量标本进行药敏检测的问题。CD-DST技术克服了其它方法的缺点：所需细胞数量少、敏感、快速、临床相关性好（日本临床广泛应用）2023/6/56第6页/共31页 7由于遗传背景的差异, 患者对化疗的反应各不相同：有的患者经化疗后可达到完全缓解, 有的却表现为无效甚至病情进展不同种类的肿瘤, 对抗癌药物的敏感性不同, 即使同一种类型的肿瘤（临床分期、病理类型、患者基本状态相同）, 不同的患者对药物的敏感性及预后也不相同。 必须化疗药物个体化2023/6/57第7页/共31页 8各种肿瘤常见化疗方案各种肿瘤癌症化疗方案docx2023/6/5第8页/共31页 9药敏试验发展历程1953年，Blank和Speer提出了“化疗(Chemotherapy)”的理念1969年，Cline提出了理想的药敏实验方法应该具备的特点：简单、快速、敏感、可筛选不同药物、与临床有良好相关性1978年，Bogden将裸鼠肾包膜下人类癌模型应用于化疗药敏实验（SRCA）1983年，Mosmann采用四氮唑盐比色法（MTT）进行药敏实验1988年，Scvin等将三磷酸腺苷-生物荧光肿瘤药敏检测技术（ATP-TCA）应用于卵巢癌肿瘤药物敏感性检测1997年，小林昶运（Kobayashi H）提出CD-DST技术，并指导医生对患者进行个体化治疗。第9页/共31页 10肿瘤药敏试验方法分类第10页/共31页 11按照培养方法的不同分类肿瘤单细胞培养：单层培养法，HTCA(人肿瘤细胞集落测定)HDRA (立体微小组织块细胞培养法)SRCA (肾包膜下移植药敏检测)CD-DST（胶滴肿瘤药敏检测技术）MTT(四氮唑化合物)法ATP-TCA法DISC法(区别染色细胞毒检测)荧光细胞印记分析法FCM法(流式细胞术) 中性红染色法按照测定原理的不同分类第11页/共31页 12一、单层培养法获得肿瘤标本，制成单细胞悬液后，加入不同浓度的化疗药，检测细胞的存活量得出药敏试验结论。特点：方法简单、实用失去了体内的三维结构药物接触浓度与体内不同人肝癌细胞第12页/共31页 13二、HTCA法(人肿瘤细胞集落测定法)将肿瘤细胞分别暴露于各种抗癌药物，再接种到软琼脂上，经过4-6周，肿瘤细胞将增殖并最终长成集落，对照集落形成数量的比较，从而分析受试药物的抗增值效应。特点：几乎适用于所有类型的肿瘤实验周期长（4-6 周）费时费力，主观性强骨髓瘤细胞集落神经母细胞瘤集落第13页/共31页 14三、HDRA(微小组织块培养药敏实验)在胶原上培养微小肿瘤组织块（1 mm3），加入化疗药物后，观察组织块对化疗药物的敏感性。特点：更接近机体实体瘤环境方法繁琐MTT处理后第14页/共31页 15四、 SRCA法(肾包膜下移植药敏检测)在裸鼠肾包膜下接种人类肿瘤组织，肿瘤形成后，将化疗药物注入裸鼠腹腔进行化疗药物实验，通过测量肿块两顶端直径，比较肿瘤体积改变，评估化疗药物效果。特点：保持肿瘤原有的生物学特性能客观反映化疗药物敏感程度实验动物要求高，价格昂贵操作过程较复杂、接种成功率低GFP标记的肿瘤细胞第15页/共31页 16五、CD-DST法(胶滴肿瘤药敏检测)将肿瘤细胞包埋于胶原凝胶滴中进行立体培养, 使其