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松材线虫病检测技术及普查方法;松材线虫病检测技术及普查方法;松材线虫病检测技及术普查方法; ;松材线虫病;松材线虫病;松材线虫病;松材线虫病;
寄主
湿地松(P. elliottii)、硫球松(P. luchuensis);非松属树种有8种:香脂冷杉(Abies balsamea)、欧洲云杉(Picea excelsa)、加拿大云杉(P. canadensis)、北美云杉(P. pungens)、欧洲落叶松(Larix europaea)、美加落叶松(L. americara)、雪松(Cedrus daeodara)、大西洋雪松(C. atlantica)等几十种松杉树上。(其中最容易感病的是黑松,在我省松材线虫病已发现在马尾松、黄山松、华山松三种松树上发生)。;松材线虫病;松材线虫病; 症状和发病过程
根据症状及发病过程可以对松材线虫病进行初步诊断,进而可以取样进行线虫分离。在尚未出现外部症状之前可以根据流脂量的变化进行早期诊断。用手摇钻在高1—1.3m树干处钻一直径1cm的小洞,深至木质部,2小时后观察流脂情况。健康树流脂量大,树脂充溢,而病树流脂少,甚至无流脂出现。此外,发病时间和死亡速度也是很重要的诊断依据。当然,少数植株,或在温度较低地区的植株也可能当年感病,翌年死亡。 ;松材线虫病;松材线虫病;发病4个阶段的典型病害症状;发病4个阶段的典型病害症状;松材线虫病;松材线虫病;松材线虫病;松材线虫病;松材线虫病;松材线虫病;松材线虫病;松材线虫病;松材线虫病;
松材线虫、松天牛、松树三者之间的生物联系
没有松褐天牛等媒介传播,松材线虫病很难转移危害,松材线虫使松树树势衰弱,流脂减少或停止,提高了传媒天牛卵及幼虫的成活率,使传媒天牛的种群增加,促进了松材线虫病的进一步扩展;传媒天牛、松材线虫不断地相互促进,加快了松林的毁灭速度。.带有传媒天牛和松材线虫病死木经人为传播和传媒天牛迁飞,造成新的疫点和新一轮侵染循环。
;;病害发展过程2-(1) 7月9日;松材线虫为害状(马尾松);松材线虫为害状(黑松);松材线虫病;松材线虫病;松褐天
牛的各
种虫态。;松褐天牛雌虫(左)和雄虫(右);松褐天牛正在
取食松树嫩枝。;;松褐 天牛
产卵刻槽(下)
和羽化孔(上);被松褐天牛和松材线虫
为害致死的松树木段。;松材线虫病检测技术;松材线虫病检测技术;松材线虫病检测技术;松材线虫病检测技术;松材线虫病检测技术;松材线虫病检测技术;;浅盘法分离线虫;松材线虫病检测技术;
c、镜检:分别将各标号盛有线虫分离液的培养皿置于解剖镜下观察,先确认有无线虫。对有线虫的样品进行活体检验,观察它的一般形态结构。然后尽量选择几条成熟、特征易观察的线虫,用针或吸管移至载玻片上的水滴中,使之沉底。将此载玻片在酒精灯火焰上方往返几次,约5—6秒至虫体突然伸直时停止,加盖玻片后在显微镜下观察。根据形态特征予以鉴别,以确定其是否为松材线虫。分别记录检验结果。记录的主要内容和形式可参照松材线虫检验记录表。
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样木保温保湿培养:将样木劈开、锯成小段,置于烧杯中,加少量清水,使木段下端浸在水中,木段上端用湿纱布覆盖,在26℃培养箱中培养3—4天,倒取杯底水液,亦可获得较多的雌雄成虫。
接种线虫的表面消毒:分离后获得的线虫悬浮液离心(1500转/分)2—3分钟浓缩至离心管底部,吸去上清液,用无菌滴管将底部线虫液约2ml移至另一无菌离心管内,加入2ml双倍浓度的消毒液,轻轻振荡混匀,一定时间后再离心浓缩,重复消毒1次,再用无菌水换洗2次即可。
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(2)临时玻片的制作
a、杀死和固定:将盛有线虫悬浮液的小烧杯置于65℃水浴中2分钟杀死线虫,经离心浓缩后即用三羟基乙胺福尔马林固定液(TAF)固定。
b、制片:在洁净的载玻片上滴1小滴水,水滴大小以加盖玻片后恰好充满盖玻片下的空间为宜。在解剖镜下挑选经固定后的雌雄成虫各两条,摆在水滴中并使其沉没,从水滴的一侧缓缓加上盖玻片,避免出现气泡,用熔化的蜡烛或指甲油封片。
;(3)虫体测计
根据德曼氏(De Man )公式分别测量虫体上各个特征器官的长短和位置,用不同的符号来表示,一般雌雄虫各测20—60条,取平均值。
L = 体长(微米) c = 体长/尾长(自虹门至尾尖)
b = 体长/头端至食道和肠连接处之长 a = 体长/最大体宽
V(% ) = (头端
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