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本发明涉及一种用于谷氨酸棒杆菌基因改造的带有阴性筛选标记的质粒。本发明的的质粒上设有蔗糖致死基因sacB,蔗糖致死基因sacB表达分泌型蔗糖果聚糖酶,用于阴性筛选。本发明的方法能在谷氨酸棒杆菌基因组中能够高效快速的实现基因修饰而不带有任何抗性标记。该方法运用基因组双链断裂的反选以及精确的同源重组修复获得目的重组菌株,利用阴性筛选标记sacB能够高效的消除重组菌株中携带的质粒,这克服了稳定性高的过表达质粒难于消除的问题,从而大大提高获得目的重组菌株的效率。该方法快速高效的消除编辑正确的目的菌株中的
(19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 (10)申请公布号 CN 112430617 A (43)申请公布日 2021.03.02 (21)申请号 202011429122.4 (22)申请日 2020.12.09
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