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本发明属于基因工程技术领域,具体而言涉及一种在无人工DNA模板的前提下,在生物体内创制定点突变的方法及应用。所述方法包括以下步骤:在生物体基因组的特定位置上按先后顺序依次产生两个以上的DNA断裂并分别自发修复,其中在后的DNA断裂以在先的DNA断裂修复后产生的新序列为基础产生。本发明根据顺次编辑产生的新的修复事件形成的序列,设计新靶点,可以在基因组的特定位置连续多次形成突变,极大的丰富DNA断裂后修复事件的类型,实现单次基因编辑无法得到的新的碱基替换、删除及插入突变。
(19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 (10)申请公布号 CN 112251419 A (43)申请公布日 2021.01.22 (21)申请号 202011089074.9 C12N 15/52 (2006.01)
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