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蛋白质检验的学习资料第1页/共92页 2本章内容概要：第二节 蛋白质检验第一节 概述第2页/共92页 31、掌握血浆蛋白质的组成、功能及分类；个别血浆蛋白质（前白蛋白、白蛋白）的来源和生理功能；血清总蛋白和白蛋白的测定方法和原理。2、熟悉急性时相反应蛋白的概念和种类；血清球蛋白和纤维蛋白原的测定方法3、了解其他蛋白质的来源和生理功能；尿液蛋白和脑脊液蛋白的检测 。本章教学要求：第3页/共92页 4蛋白质概念：蛋白质(protein)是由许多氨基酸(amino acids)通过肽键(peptide bond)相连形成的高分子含氮化合物。第4页/共92页 5第一节 概 述机体蛋白质：体液蛋白质的检测： 机体主要的 生物大分子含量：人体固体成分的45%种类：10万，3000~5000种/单细胞功能：生长，代谢、血凝、运动、免疫、信息传递等疾病发生体液蛋白质异常第5页/共92页 6要判断异常首先要清楚正常的血浆蛋白质组成，功能及分类及特点一、血浆蛋白质的分类及功能组成：种类：1000种 500种 200种含量：μg mg g来源：肝脏是蛋白质主要的加工厂除免疫球蛋白、蛋白类激素。第6页/共92页 7（一）血浆蛋白质的功能：①营养作用，修补组织蛋白;②维持血浆胶体渗透压：白蛋白维持75%～80%的血浆渗透压；③作为PH缓冲系统的一部分：酸性或碱性蛋白质；④运输作用：作为激素、维生素、脂类、代谢产物、离子、药物等的载体；⑤体液免疫防御系统：抗体与补体等免疫分子；⑥催化作用：酶的本质；⑦代谢调控；作为底物、酶或中间产物抑制、激活组织蛋白酶；⑧参与凝血与纤维蛋白溶解；除Ⅳ因子外均可。第7页/共92页 8（二）血浆蛋白质的分类：依据来源、分离方法和生理功能来源肝生成：绝大多数血浆蛋白质其他组织细胞生成：免疫球蛋白和蛋白类激素第8页/共92页 91.根据分离方法分类盐析法：白蛋白和球蛋白（pH7.0半饱和的硫酸铵溶液）电泳法：醋酸纤维素薄膜电泳：5种琼脂糖凝胶电泳：13种聚丙烯酰胺凝胶电泳：30种SDS聚丙烯酰胺凝胶等电双向电泳：300种分辨率增高---+纤维蛋白原醋酸纤维素薄膜---+纤维蛋白原醋酸纤维素薄膜第9页/共92页 102.根据生理功能分类:第10页/共92页 11二、血浆中几种重要的蛋白质结构： MW=54000，四个相同亚基构成的四聚体。理化性质：pＩ＝4.7，肝细胞合成，半寿期12 小时。测定方法：免疫比浊法 免疫扩散技术。（一）前清蛋白（PA）　　急性时相反应蛋白 第11页/共92页 12功能： 营养指标（修补组织材料） 载体功能（甲状腺素／维生素Ａ）。临床意义：营养不良和肝功能不全的敏感性升高的指标；降低：营养不良，肝功不全， 急性炎症，恶性肿瘤， 肝硬化及肾炎时。参考值： 200—400mg/L 。第12页/共92页 13结构：585个aa残基构成单链多肽MW=66458，含17个二硫键。理化性质：pI=4－5.8，肝细胞合成但不储存，半衰期为15-19 天，占总蛋白的57%－68%，pＨ7.4时带负电。测定方法：色素结合法:溴甲酚绿（BCG），溴甲酚紫（BCP）,盐析等。（二）清蛋白（ALb）　急性时相反应蛋白 　　　　　　　第13页/共92页 14功能：营养作用，运输作用（高亲和力），维持血浆渗透压和正常pＨ值。临床意义：合成受食物影响，敏感性较低。降低:在营养不良，肝功不全，急慢性肝疾病时;增高:肾病综合征，少见,假性升高。参考值：35-50 g/Ｌ第14页/共92页 15结构：394个aa残基构成的单链多肽，含10％～12% 的糖 MW=5.1 万。理化性质：pI值为4.8，占α1-球蛋白区带显色的90％。测定方法：免疫化学法（常用），电泳（酸性凝胶电泳或等电聚焦电泳），利用蛋白酶抑制能力测定等。（三）α1-抗胰蛋白酶（α1-AT/AAT） 具有蛋白酶抑制的急性时相反应蛋白 第15页/共92页 16功能：蛋白酶抑制物（具有90％的抑制蛋白酶活力）。如糜蛋白酶，弹性蛋白酶，但此抑制作用有明显的pＨ依赖性。参考值：成人：0.83－1.99g/L， 新生儿：1.45－2.7g/L临床意义：升高：感染性疾病(细菌性、病毒性)、恶性肿瘤、胶原病、妊娠、外科手术、药物(雌激素、口服避孕药、肾上腺类固醇、前列腺素等)，斑疹伤寒等。降低：α1-AT缺乏症、新生儿呼吸窘迫综合征、重症肝炎、肾病综合征、蛋白丧失性胃肠症、营养不良、未成熟儿、肾移植早期排斥反应等。第16页/共92页 17结构：181个aa残基构成的单链多肽， MW=4万，含45%