一种基于二代测序技术在属水平实现蓝藻绝对定量的方法.pdfVIP

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2023-05-24 发布于四川
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一种基于二代测序技术在属水平实现蓝藻绝对定量的方法.pdf

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本发明公开了一种基于二代测序技术在属水平实现蓝藻绝对定量的方法，涉及蓝藻绝对定量相关领域，通过向样品中添加人工合成DNA内参，同时对蓝藻门下各属的16SrRNA基因拷贝数进行矫正，从而实现在属水平对蓝藻群体的准确绝对定量，揭示出蓝藻菌群结构的真实变化。包括如下步骤：S1：合成P‑Spikes序列，克隆至质粒pMA‑T，将质粒导入大肠杆菌；S2：将已知量的P‑Spikes加入到环境样品，DNA提取，PCR扩增，反应完成琼脂糖凝胶电泳检测，利用PCR产物纯化试剂盒纯化处理；S3：建库构建，得到环境

(19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 (10)申请公布号 CN 112159856 A (43)申请公布日 2021.01.01 (21)申请号 202011214313.9 (22)申请日 2020.11.04 (71)申请人江苏宏众百德生物科技有限公司