一种猪急性腹泻综合征冠状病毒人工染色体重组载体及其构建方法和应用.pdfVIP

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2023-05-14 发布于四川
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一种猪急性腹泻综合征冠状病毒人工染色体重组载体及其构建方法和应用.pdf

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本发明公开了一种猪急性腹泻综合征冠状病毒人工染色体重组载体及其构建方法和应用。本发明利用Gibson组装将猪急性腹泻综合征冠状病毒基因组分段克隆到大肠杆菌的细菌人工染色体中，并将全长感染性克隆和辅助质粒共转染哺乳动物细胞快速拯救得到与野生型亲本基因相同的病毒。本发明绕过了传统方法繁琐的酶切位点设计和酶切连接操作，且病毒BAC在大肠杆菌中是稳定的，可以通过DNA同源重组工程和反向筛选系统进行进一步的基因操作。同时，本发明成功构建了毒株SADS‑CoV‑WT的感染性克隆并建立了基于DNA同源重组工程

(19)国家知识产权局 (12)发明专利 (10)授权公告号 CN 114657213 B (45)授权公告日 2022.08.02 (21)申请号 202210559369.0 C12R 1/19 (2006.01) (22)申请日 2022.