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Sox9基因在水产动物中的研究综述 摘要：Sox9基因是继SRY基因之后人们发现的第一个具有内含子的Sox家族成员，Sox9基因的功能呈现多样性，该基因在发育过程中参与性别的决定，软骨的形成以及神经系统和性腺的形成。本文从Sox9在水产动物中研究发展等方面进行了综述，为进一步研究Sox9基因提供参考资料。 关键词：水产动物，Sox9基因，研究发展 SRY（Y染色体的性别决定区域）相关促进HMG（人绝经促性腺素）盒基因家族的共性就是具有一个可以编码大约79个氨基酸的HMG保守序列。Sox基因中都很少含有内含子，最早发现内含子的Sox9基因。由于基因决定了性状的表达，因此人类新基因的发现途径很大一部分都是从疾病中发现的，Sox9基因亦是如此，Sox9基因最先是在人类一种躯干发育异常中发现的，该疾病的症状是软骨内成骨异常进而导致CD综合症的基因同时也参与了性别决定。Sox9基因分布广泛，不论是在低等生物还是高等生物中都发现了Sox9的存在。在哺乳动物中，尤其是人类和小鼠中，Sox9基因的功能研究较为透彻，某些研究发现Sox9基因在水产动物中表达存在性别差异，但受研究方法以及受关注度的影响并未大，未发现合理的表达规律性存在，这也可能与鱼类等水产动物的性别决定类型和性别决定方式复杂多样有关。 Sox9基因的结构和功能 1.1 Sox9基因的特点 （1）Sox9基因3、端有多聚腺苷酸结构，位于末端多聚腺苷酸的上游19bp左右，(2) Sox9基因含有按个外显子和两个内含子，呈典型的剪切位点连接，不同于人SRY单一外显子结构，是报道的第一个含有内含子的Sox9基因，（3）Sox9基因包含有一个开放阅读框，具有高泳动蛋白基序和4个潜在的起始密码，能编码509个氨基酸残基以构成HMG盒，与SRY基因具有71%的同源性。 1.2 Sox9蛋白识别序列的特异性 Sox9 HMG盒和所有被检测的Sox蛋白一样，结合SRY高亲和力的结合位点AACAAT和TCF1的结合位点AACAAAG。人类的Sox9体外高亲和力的结合位点是AGAACAAAG。Sox9的HMG box可以与人类II 型胶原基因的软骨细胞特异性增强子的序列结合，与DNA结合后也可使DNA弯曲成角，改变DNA的空间构型，进行表达调控。 近年来，作为常染色体上的基因Sox9在性别决定中扮演的角色日趋凸显。首先，Sox9在性别决定中与诸多的基因互作。在SRY ORF5’端40kb处有一个CpG岛，可作为WT-1的识别基序，WT-1在性别分化的早期参与SRY的激活。一旦SRY在XY性腺中表达，Sox9表达的显著上调，它在亚细胞中的定位发生改变，在mportin/CaM的协助下从胞质转入胞核。在SRY表达开始，，Vnnl,Dhh Fg9页开始表达，他们是SRY作用的靶或协调Sox9的表达。在SRY表达之后，Wmt4的表达，性腺将发育成睾丸。而在发育的卵巢中Wnt4和DAX1表达下调。有证据表明，Sox9在性腺中Wnt4表达量提高. Sox9参与SF1，WT1，GAGT4对AMH启动子的调节，他们形成一个复合体，这个复合体通过HSP70-WT1和HSP70- Sox9相互作用而稳定。此外，Sox9可能涉及到开启睾丸决定基因。 2 近年来水产动物Sox9的研究及成果 Sox9基因在鱼类等水产动物中扮演者怎样的角色，在这几年研究者进行了一系列的研究。现有研究已证实在一些鱼类中也存在Sox9基因，俞菊华等在黄颡鱼卵巢中应用RT-PCR技术，分离克隆得到了Sox9基因的保守片段，而曹丽萍等使用RT-PCR和RACE法也分离和克隆了奥利亚罗非鱼卵巢中的Sox9基因cDNA的全长序列，其序列全长1582bp.我们知道Sox9在哺乳动物的性腺表达具有明显的差异性，只在性腺的精巢里表达，具有表达的专一性，是哺乳动物性别决定直接相关的基因。周等在黄鳝也发现黄鳝的卵巢中有Sox9基因的表达，陈金平等研究测出Sox9基因在史氏鲟精巢和卵巢中的表达量相差不大，说明Sox9基因对史氏鲟精巢发育和性别分化所起的作用不明显，这与Sox9基因在青鳉性腺中的表达规律有些相似，在青鳉卵巢中Sox9也有大量表达，但精巢中表达量较少。Chiang在斑马鱼中筛选到了两个Sox9基因，分别命名为Sox9a和Sox9b。他们别定位在复制的染色体区域，使用RT-PCR后再进行杂交测定这两个基因在斑马鱼成鱼的表达情况，结果Sox9b只在卵巢中表达，而Sox9a如在脑，胸鳍，肾，肌肉，精巢都有表达，但在心脏，肝，消化道，卵巢则不表达。但刘季芳研究异源四倍体鲫鲤时用Northern杂交分析显示，这两个Sox9基因在精巢中宏量表达，而卵巢中不表达。 在表达量与时间的联系上，陈金平等分析了史氏鲟Sox9基因表达量发育阶段和组织的不同而稍有差异，在刚