高中生物 检测生物组织中的糖类脂肪和蛋白质.pptxVIP

会计学第1页/共30页实验：检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质实验原理：某些化学试剂能够使生物组织中的有关有机化合物产生特定的颜色反应。水浴加热①还原糖 + 斐林试剂 砖红色沉淀②脂肪 + 苏丹Ⅲ（或苏丹Ⅳ）染液→橘黄色（或红色） ③蛋白质 + 双缩脲试剂→紫色④淀粉 + 碘→蓝色化学试剂+有机化合物→特定的颜色第2页/共30页一、可溶性还原糖的检测：水浴加热（1）原理：还原糖 + 斐林试剂 砖红色沉淀。（2）选材：苹果、梨、白萝卜。含糖量较高，颜色为白色或近于白色的植物组织。（3）检测过程：刚配制的斐林试剂2mL50～65℃水浴加热2min2mL组织样液振荡混匀呈现浅蓝色变成砖红色（Cu2O）还原糖：含有半缩醛羟基的糖类，主要是葡萄糖、果糖和麦芽糖。蔗糖、淀粉和纤维素属于非还原糖。第3页/共30页 当质量浓度为0.1g/mL的氢氧化钠溶液与质量浓度为0.05g/mL的硫酸铜溶液混合后，立即生成淡蓝色的Cu（OH）2悬浊液。 Cu（OH）2与葡萄糖、果糖、麦芽糖等可溶性还原糖共热，能够生成砖红色的Cu2O沉淀。因此，利用该反应，可证明样液中含可溶性还原糖。R—CHO+2Cu(OH)2→R—COOH+Cu2O↓+2H2O甲液乙液等量混合，现用现配，切不可分开滴加，或者久置后才用。第4页/共30页制备组织样液砖红色的糖（还原糖）非（斐林试剂）常好吃洗净、去皮、切块过滤滤液梨或苹果研磨取5g，放入研钵中（用单层纱布）显色反应 向试管中加入2ml新配制的斐林试剂或本尼迪特试剂振荡混匀50～65℃水浴加热2min向试管中加入2ml组织样液观察溶液颜色变化：浅蓝色→棕色→砖红色观察现象 结论：生成砖红色沉淀，说明梨或苹果中含有还原糖。第5页/共30页50?65℃水浴加热约2min2 ml组织样液1 ml新配制的斐林试剂观察颜色变化浅蓝色棕 色砖红色【斐林试剂】：甲液：0.1g/mL的NaOH溶液，乙液：0.05 g/mL的CuSO4溶液，使用前等体积混合均匀（生成浅蓝色的Cu（OH）2悬浊液），现配现用（时间一长，Cu（OH）2 沉淀在溶液底部无法发生反应。且需要水浴加热。第6页/共30页还原糖的检测结果斐林试剂与可溶性还原糖在水浴热的条件下，生成砖红色的Cu2O沉淀。-COOH+Cu2O↓（砖红色）-CHO+Cu(OH)2悬浊液第7页/共30页二、脂肪的检测（1）选材：经浸泡去种皮的花生种子。（2）检测过程：苏三（苏丹Ⅲ）送了我一个橘黄色的胭脂（脂肪）切片：花生种子（浸泡３－４h），去皮，将子叶削成薄片。选取最薄的切片置于洁净的载玻片中央染色：在薄片上滴加2?3滴苏丹Ⅲ染液，染色2?3min制片洗去浮色：用吸水纸吸去染液，滴加体积分数为50%的酒精1?2滴制成临时装片：滴1?2滴蒸馏水，盖上盖玻片视野中有橘黄色颗粒镜检观察：在低倍镜下寻找到已着色的圆形小颗粒，然后用高倍镜观察。第8页/共30页橘黄色小圆颗粒即为脂肪颗粒脂肪 + 苏丹Ⅲ（或苏丹Ⅳ）染液 橘黄色（或红色）第9页/共30页第10页/共30页注意事项：（1）若用花生种子作实验材料，必须提前浸泡3～4小时，浸泡时间短了，不容易切片，浸泡时间过长，则组织太软，切下的薄片不易成形，切片要尽可能的薄。（2）染色后一定要用50%的酒精溶液洗去浮色（酒精能溶解苏丹Ⅲ），染色和洗浮色时间不宜过长。第11页/共30页三、蛋白质的检测：双（双缩脲）子（紫色）弹（蛋白质）（1）原理：蛋白质 + 双缩脲试剂 紫色络合物（2）选材：黄豆、鸡蛋清（稀释）、牛奶、豆浆（3）检测过程：3-4滴双缩脲试剂B液，摇匀2 ml组织样液2 ml双缩脲试剂A液，摇匀观察颜色变化紫色第12页/共30页双缩脲≠双缩脲试剂 将尿素加热，两分子尿素放出一分子氨而缩合成双缩脲。反应式为: 双缩脲（H2NOC-NH-CONH2）在碱性环境（NaOH）中能和Cu2+作用生成紫色的络化物，这个反应叫做双缩脲反应。蛋白质分子中含有的肽键结构与双缩脲结构相似，因此，蛋白质也可与双缩脲试剂发生颜色反应。第13页/共30页2mL组织样液双缩脲试剂A 2mL双缩脲试剂B 3-4滴（提供Cu2+）（创造碱性条件）紫色无色在碱性条件（NaOH）下，蛋白质中的肽键（—NH—CO—）与Cu2＋作用生生紫色络合物。因此，操作时，应先加A再加B，且A多B少，如果B过量， Cu2＋的蓝色就会遮盖生成的紫色。第14页/共30页制备组织样液黄豆组织样液（或鸡蛋清稀释液）浸泡过滤滤液黄豆研磨去皮、切片稀释鸡蛋蛋清液鸡蛋清稀释液显色反应向试管中注入2ml组织样液向试管中注入2ml双缩脲试剂A加入3-4滴双缩脲试剂B观察颜色变化：无→紫色观察现象结论：加入双缩脲试剂A后，颜色