荧光分光光度计操作规程.pdfVIP

. 日本日立F-7000 荧光分光光度计基本操作规程 1、开机顺序 （1）开启计算机。（按图中圆圈按钮） （2 ）开启仪器主机电源。按下仪器主机左侧面板下方的黑色按钮 （POWER ）。（按下图中圆圈按钮） （3 ）观察主机正面面板右侧的Xe LAMP 和RUN 指示灯依次亮起来， . . 都显示黄绿色。Xe LAMP 灯先亮，RUN 灯后亮。 2、打开运行软件。 （1）双击桌面图标 （FL Solution 2.1 for F-7000 ）。主机自行初始化，扫描界面自动进入。 （2 ）初始化结束后，须预热15-20 分钟(若要进行定量分析，须预热 . . 30 分钟以上，按界面提示选择操作方式。 3.点击右上角Method,进行方法设置。 若要预扫描，可选择3-D scan （如下图）.设置好方法后（见下图）， 再点击右上角Pre Scan （如上图）， . . 在Instrument Monitor 菜单(见下图) 的Data mode 中选择Fluorescence, 在EX Start WL 中输入激发波长200，EX End WL 中输入激发波长500, 在EM Start WL 中输入发射波长210(有利于保护检测器)，在EM End WL 中输入700(nm)，为节约扫描时间，扫描速度Scan speed 可设置 为30000 。点击update,可知扫描需要多少时间。EX slit 和EM slit 一 般选择 5.0 （若荧光强度太弱，可提高该数值，若强度太高，可降低 该数值），PMT Voltage （电压）中可选择700 （若荧光强度太弱，可 . . 提高该数值，若强度太高，可降低该数值），PMT Voltage 0-1000v 前 面的方框打勾后，可在上面的 PMT Voltage 中随意填写电压值。在 Response 中选择Auto 。 在Processing 菜单中(见下图) 的 Y Axis 中的Ma 中填5000 或10000， . . Min 中填0 。Contour 中填写10，在open data processing window after data acquisitior 前打勾。 再点击右上角Pre Scan （如下图），进行预扫描。 . . 然后选择图谱中颜色最浓、最深、纵坐标最高的漩涡中心点，点击这 个中心点，即可出现最佳激发波长、最佳发射波长及强度。 . . 若中心点太密，看不出（如上图），可点击右键，选择scale，将contour 由10.00改为100。再点击确定。 即可出现下图情况： . . 点击纵坐标最高的漩涡中心，如上图和下图，在左上角即可出现最佳 激发波长（EX）、最佳发射波长(EM)及强度。 待预扫描结束后，可再次点击Method, 进行重新设置，在General菜 .