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一、食品分析检验的目的和任务;二、食品仪器分析法及其特点;二、食品仪器分析法及其特点;三、食品仪器分析方法的选择;四、食品仪器分析方法的有效性;四、食品仪器分析方法的有效性;四、食品仪器分析方法的有效性;四、食品仪器分析方法的有效性;四、食品仪器分析方法的有效性;四、食品仪器分析方法的有效性;四、食品仪器分析方法的有效性;四、食品仪器分析方法的有效性;;项目一;项目一 紫外-可见吸收光谱法及应用 ;项目一 紫外-可见吸收光谱法及应用;项目一 紫外-可见吸收光谱法及应用;项目一 紫外-可见吸收光谱法及应用; 实验证明,将两种适当颜色的光按照一定的强度比例混合,可以成为白光,那么这两种色光就称为互补色光。
图中处于对顶关系的两种颜色的光即为互补色光。例如黄色光和蓝色光互补,绿色光与红紫色光互补,橙色光与青色光互补等等。
;
;; 例如:当一束白光通过KMnO4溶液时,该溶液中的离子或分子选择性地吸收了500~560nm的绿色光,而将其他的色光两两互补成白光而通过,只剩下红紫色光未被互补,所以KMnO4溶液呈现紫红色。
同样道理,K2CrO4溶液对可见光中的蓝色光有最大吸收,所以溶液呈蓝色的互补色光黄色。
可见物质的颜色是基于物质对光有选择性吸收的结果,而物质呈现的颜色则是被物质吸收光的互补色。
; 三、物质的吸收光谱曲线
以不同波长的单色光作为入射光,测定某一溶液的吸光度。然后以入射光的不同波长为横坐标,各相应的吸光度为纵坐标作图,可得到溶液的吸收光谱曲线(简称吸收曲线) 。
吸收光谱曲线是物质的特征性曲线,它和分子结构有严格的对应关系故可作为定性分析的依据。不同的物质,分子的结构不同,其吸收光谱曲线也有其特殊形状。
;;;图1-5 单色光通过盛有溶液的吸收池示意图; (一)透光度和吸光度
透光度,又称透射比或透光率,为透过光的强度It与入射光强度I0之比,用T表示,即
当入射光全部吸收时,It=0,T=0;当入射光全部透过时,It=I0,所以0≤T≤1。; (二)朗伯-比耳定律
光被透明介质吸??的比例正比于光程中吸收光的分子的数目,而与入射光强度无关,这就是朗伯-比耳定律,是紫外-可见分光光度法进行定量分析的理论基础。用数学公式表示为:
式中,K为吸光系数,与入射光的波长、物质的性质和溶液的温度等因素有关。
朗伯-比耳定律表明:当一束平行单色光垂直入射通过均匀、透明的吸光物质的稀溶液时,溶液对光的吸收程度与溶液的浓度及液层厚度的乘积成正比。 ; 朗伯-比耳定律应用的条件:一是必须使用单色光;二是吸收发生在均匀的介质中;三是吸收过程吸光物质相互不发生作用。
必须指出的是:朗伯-比尔定律只能在一定浓度范围内才适用。因为浓度过高或过低,溶质会发生电离或聚合而产生误差。
朗伯-比耳定律适用于可见光、紫外光、红外光和均匀非散射的液体。
(三)吸光系数 朗伯-比耳定律的数学表达式中K称为吸光系数,其物理意义是:单位浓度的溶液,液层厚度为1cm时,在一定波长下测得的吸光度。; K值的大小取决于吸光物质的性质、入射光波长、溶液温度和溶剂性质等,与溶液浓度大小和液层厚度无关。但K值大小因溶液浓度所采用的单位不同而异。
1、摩尔吸光系数ε 当浓度以物质的量浓度(mol/L)表示,液层厚度以厘米(cm)表示时,相应的比例常数K称为摩尔吸光系数,以ε表示,其单位为L/(mol?cm)。这样,朗伯-比耳定律的数学表达式可以改写成:
摩尔吸光系数的物理意义是:浓度为lmol/L的溶液,于厚度为1cm的吸收池中,在一定波长下测得的吸光度。 ; 摩尔吸光系数是吸光物质的重要参数之一,它反映吸光物质对光的吸收能力,也反映用吸收光谱法测定该吸光物质的灵敏度。物质对某波长光的吸收能力愈强,ε愈大,测定时灵敏度也就愈高。因此,为了提高分析的灵敏度,测定时通常选择ε大的有色化合物进行测定,选择具有最大ε值的波长作入射光。一般认为
灵敏度较低:ε1×104L/(mol·cm)
中等灵敏度:ε在1×104~6×104L/(mol·cm)之间
高灵敏度: ε6×104L/(mol·cm),。 摩尔吸光系数由实验测得。在实际测量中,不能直接取1mol/L这样高浓度的溶液去测量摩尔吸光系数,只能在稀溶液中测量后,换算成摩尔吸光系数。; 2、质量吸光系数a 质
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