第三章氨基酸与蛋白质.pptxVIP

第三章氨基酸与蛋白质;结构 性质;第一章氨基酸结构和性质; 惯用方法：硫酸或盐酸处理 浓度:盐酸为6mol/L 硫酸为4mol/L 条件:回流煮沸20 h左右 优点:不引发消旋作用，得到L-氨基酸 缺点:色氨酸完全被沸酸所破坏 羟基氨基酸（丝,苏）部分被水解 天冬酰胺和谷氨酰胺酰胺基被水解下来 ;惯用方法：用氢氧化钠处理 浓度: 5mol/L 条件:共煮10~20 h 优点:色氨酸稳定 缺点:多数氨基酸遭到不一样程度破坏，而且产生 消旋现象；所得为D型和L型混合氨基酸； 碱水解引发精氨酸脱氨，生成鸟氨酸和尿素;优点:不产生消旋作用，也不破坏氨基酸 缺点:需要几个酶协同作用， 酶水解所需时间较长 ;水解位点;;;1.2 蛋白质基本结构单元;第三章氨基酸与蛋白质;1.2 蛋白质基本结构单元;L－氨基酸;2.1 氨基酸分类（名称，缩写，结构式）;2.1 氨基酸分类;Gly G Ala A Val V Leu L Met M Ile I;氨基酸;①一氨基一羧基氨基酸有甘氨酸、丙氨酸、缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸 ②含羟基氨基酸有丝氨酸、苏氨酸 ③含硫氨基酸有半胱氨酸、蛋氨酸（常称甲硫氨酸） ④一氨基二羧基氨基酸有天冬氨酸、谷氨酸 ⑤二氨基一羧基氨基酸有赖氨酸、精氨酸 ⑥含酰胺基氨基酸有天冬酰胺、谷氨酰胺;①一氨基一羧基氨基酸1;普通名称;普通名称;普通名称;普通名称;②含羟基氨基酸1 ;普通名称;③含硫氨基酸1 ;普通名称;第三章氨基酸与蛋白质;普通名称;④一氨基二羧基氨基酸1 ;普通名称;⑤二氨基一羧基氨基酸1 ;普通名称;⑥含酰胺基氨基酸1 ;普通名称;普通名称;普通名称;普通名称;普通名称;普通名称;（2）依据R基团极性;①非极性R基氨基酸;②极性但不带电荷R基氨基酸;③带负电荷R基氨基酸;④带正电荷R基氨基酸;（3）依据酸碱性质;（4）按氨基酸是否能在人体内合成;?-丙氨酸;甲状腺氨酸;肌氨酸;3.1 氨基酸普通物理性质;④光吸收性 在可见光区域，20各种氨基酸都没有光吸收，但在红外区和远紫外区域（λ＜220 nm）都有光吸收。因为色氨酸、酪氨酸和苯丙氨酸分子中R基含有苯环共轭?键系统，故在近紫外区显示特征性吸收谱带，酪氨酸?max＝275nm，苯丙氨酸?max＝257nm，色氨酸?max＝280nm，以色氨酸吸收最强。 可利用此性质采取紫外分分光度法测定蛋白质含量。 ;3.2 氨基酸酸碱性质;3.2.1 氨基酸两性解离;;加碱时;完全质子化氨基酸能够看成是多元酸，侧链不能解离中性氨基酸可看作是二元酸,它分步解离以下：;第三章氨基酸与蛋白质;其中K1和K2分别代表第一步解离（?-碳原子上-COOH解离）和第二步解离（?-碳原子上-NH3+解离）（表观）解离常数。其数值为 K1 = [ Ao][ H+]/[ A+] K2 = [ A-][ H+]/[ Ao] ;经过测定滴定曲线能够求得氨基酸解离常数 ;; 当溶液为某一pH值，氨基酸分子中所含-NH3+和-COO-数目恰好相等时(净电荷为0),这一pH值即为氨基酸等电点，简称pI。在等电点时，氨基酸既不向正极也不向负极移动，即氨基酸处于两性离子状态;C;丙氨酸pI计算;天冬氨酸pI计算;赖氨酸pI计算; pI = (pK1+pKR)/2;侧链不含解离基团中性氨基酸，其等电点是它pK’1和pK’2算术平均值：pI = (pK’1 + pK’2 )/2 一样，对于侧链含有可解离基团氨基酸，其pI值也决定于两性离子两边pK’值算术平均值 酸性氨基酸：pI = (pK’1 + pK’R)/2 碱性氨基酸：pI = (pK’2 + pK’R)/2 ;氨基酸不能直接用酸、碱滴定定量测定 其原因是氨基酸酸、碱滴定终点时pH过高（12~13）或过低（1~2），超出酸碱滴定指示剂显色范围 若向氨基酸溶液中加入过量甲醛，因为甲醛与氨基酸中氨基（-NH2）反应生成羟甲基化合物而降低氨基碱性，反应向右进行，促进了氨基酸-NH3+酸性解离，释放出H＋，使反应终点pH从12~13下降至9附近，能够用酚酞作指示剂用标准NaOH溶液加以滴定这就是氨基酸甲醛滴定法;甲醛反应; ?-氨基参加反应 ?-羧基参加反应 ?-氨基和?-羧基共同参加反应 侧链R基参加反应; ;4.1 ?-氨基参加反应;4.1.1 与亚硝酸反应;4.1.2 酰基化反应;5-二甲氨基萘磺酰氯（丹磺酰氯）。它含有强烈荧光，可用荧光光度计快速检出，灵敏度高;丹磺酰氯反应;4.1.3 烃基化反应; AA DNFB+多肽 蛋白;R;用途：能够用来判