消毒剂消毒效力及有效期验证方案.docxVIP

消毒剂消毒效力及有效期确认验证方案 目的：确认各洁净级别的操作间及设备外表面按照规定的消毒程序消毒能够达到消毒、防止污染 的目的，并在消毒剂有效期内能确保其消毒效力能符合要求。 范围：本验证方案适用于本公司洁净区的墙面、天花板、门窗、机器设备、仪器、操作台、地漏、 推车、桌椅等表面以及操作人员双手（手套）的消毒等。 参考文件药品生产验证指南2003版 微生物检测验证技术（中国医药科技出版社）概述 本公司的洁净区为十万级和万级洁净区，拟定用于洁净区表面消毒的有两种消毒剂： 75%乙醇、0.1%新洁尔灭溶液。本次验证方案将选用以上两种消毒剂分别进行验证。 长期作用对象一样的消毒剂每月轮换使用，避免表面微生物产生耐药菌株。在利用消毒 剂进行表面擦拭消毒过程中消毒剂的作用时间应不少于10分钟，利用消毒剂进行浸泡 消毒的不少于5分钟。 消毒剂的种类、消毒对象、消毒方法和有效期 序号 名称 消毒对象 消毒方法 有效期 1 75%乙醇 用于设备表面、器具和手消毒。 采用擦拭或喷 洒方式 密闭保存7天。 4 0.1%新洁尔灭 溶液 用于地面、墙面、器具、工作服、 清洁布’、拖布和洁净鞋的消毒 采用擦拭或浸 泡方式 密闭保存7天。 为了确认消毒剂的消毒效力，通过表面实验法进行实验室考察试验部分。 洁净区设施表面材质基本都是不锈钢和玻璃两种，故表面试验法选用不锈钢载片和玻璃 裁片模拟洁净区设施表面进行验证试验。 两种试验方法作用的消毒剂见表。 序号 试验方法 消毒剂 1 表面实验法 75%乙醇 2 0.1 %新洁尔灭溶液 现场考察试验部分选择固体车间（D级）的制粒一、小容量注射剂车间（C级）的配液间、 灌封间层流罩（A级）设备表面消毒前和消毒后分别进行取样，测定其微生物数量。 确认前准备验证用试剂与材料 菌种 序号 名称 序列号 1 金黄色葡萄球菌 [CMCC(B)26003] 2 大肠埃希菌 [CMCC(B)44102] 3 白色念珠菌 [CMCC(F) 98001] 培养基 序号 名称 备注 1 营养琼脂培养基 培养基经121 ℃, 20min灭菌备用 2 营养肉汤培养基 3 改良马丁琼脂培养基 4 改良马丁培养基 5 大豆酪蛋白琼脂培养基接触碟 （编号：BZW12085） 规格：：（f）55mm,取样面积为25m2 6 玫瑰红钠琼脂培养接触碟 （编号：BZW15129） 稀释液0.9%无菌氯化钠溶液（NS） 器具及设备验证用试剂与材料记录见附录1。 序号 名称 1 无菌移液管 2 锥形瓶 3 无菌试管 4 漩涡混合器 5 恒温水浴锅 6 恒温怛湿培养箱 7 恒温恒湿培养箱 消毒剂消毒效力试验表面擦拭消毒效果试验 试验目的 由于75%乙醇、0.1%新洁尔灭溶液是通过擦拭消毒，故选用百级层流工作台、万级洁 净区、十万级洁净区表面以及手消毒进行试验，确定其消毒效力是否符合要求。 取样消毒前对洁净区进行表面微生物取样。 取样地点：百级层流工作台、万级洁净区、十万级洁净区墙壁和设备表面。 取样要求生产操作结束后操作人员按照《生产区清洁》对洁净区进行清洁消毒。 清洁消毒完毕15分钟后，现场QA对清洁消毒后的洁净区进行表面微生物取样。 至少进行3次试验。 手消毒消毒效果确认试验菌种选择 由于75%乙醇、0.1%新洁尔灭溶液中低效消毒剂，且不能杀灭芽抱，故试验用菌为金 黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、白色念珠菌。 菌液的制备及计数金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌工作菌液的制备 接种金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌的新鲜培养物至营养肉汤培养基中，30?35℃培养 18?24小时。取上述培养物用0.9%无菌氯化钠溶液做10倍系列稀释成 1x108~5x108CFU/ml的工作菌液（如肉汤培养物的浓度已为1x108?5x108cFU/ml,可 不再用0.9%无菌氯化钠溶液稀释）。 计数时，将1 x108~5x108CFU/ml的工作菌液10倍系列稀释成含50?100CFU/ml菌液, 并同时采用营养琼脂培养基30?35℃培养2天计数。计算该稀释级的平均菌落数，将 计数结果换算成每毫升浓菌液的菌落数。 白色念珠菌工作菌液的制备接种白色念珠菌的新鲜培养物至营养肉汤培养基中，23?28℃培养24?48小时。取上 述培养物用0.9%无菌氯化钠溶液做10倍系列稀释成1x108~5x108cFU/ml的工作菌液 （如肉汤培养物的浓度已为1x108?5x108cFU/ml,可不再用0.9%无菌氯化钠溶液稀 释）。计数时，将1x108?5x108CFU/ml的工作菌液10倍系列稀释成含50?100CFU/ml 菌液，并同时采用改良马丁琼脂培养基23?28c培养3天计数。计算该稀释级的平均菌 落数，将计数结果换算成每毫升浓菌液的菌落数。 结果计算 计算试验组和对照组的活菌浓度（CFU/ml）,并