临床检验基础：粪便化学检验.pptVIP

优点： 1.灵敏度高：0.2mg/L或0.03mg/g粪便 2.特异性高：不受动物血液、食物、药物等的干扰，不需要控制饮食。 缺点: a.假阴性： 1.免疫学法隐血试验主要检测下消化道出血，约有40-50%的上消化道出血不能检出。 2.前带现象：出血量过多，血红蛋白浓度过高。(稀释后再检测) 3.病人血红蛋白抗原与单克隆抗体不匹配。 b.假阳性：灵敏度过高造成假阳性。生理情况下胃肠道排血液0.5～1.5ml/d。马拉松运动员出血平均可达4ml/d。服阿斯匹林2.5g出血可达2～5ml/d。 第六章 粪便检验 目 的 要 求 1.掌握粪便隐血试验的 原理 2.掌握粪便隐血试验的 方法及其注意事项 3.掌握粪便隐血试验临床意义 粪便隐血试验 一、概念 上消化道少量出血(少于5ml)时，红细胞被分解破坏，肉眼或在显微镜下不能发现，称为隐血(OB)。 用化学法或免疫法等检验隐血，称为隐血试验(OBT）。 二、方法 (一)化学法(邻甲苯胺法、邻联甲苯胺法、匹拉米洞法等 ) (二)干化学试纸法 (三)免疫学方法(免疫胶体金试纸法) 几种化学法隐血试验的比较 方法 灵敏度 (Hb最小检出量) 可检 出血量 临床应用 邻联甲苯胺法 高，0.2～1mg/L 1～5ml 易假阳性 邻甲苯胺法 高，0.2～1mg/L 1～5ml 易假阳性 还原酚酞法 高，1mg/L? 试剂不稳定，淘汰 联苯胺法 中，2mg/L 5～10ml 试剂致癌性，淘汰 匹拉米洞法 中，1～5mg/L 5～10ml 中度敏感，较适宜 无色孔雀绿法 中，1～5mg/L 5～10ml 中度敏感，较适宜 愈创木酯法 低，6～10mg/L 20ml 假阳性极少， 特异性较高 (一)邻甲苯胺法 1．原理 Hb中的亚铁血红素有类似过氧化物酶的活性，能催化过氧化氢释放出[O]，使邻—甲苯胺氧化成蓝色的邻甲偶氮苯。 (一)邻甲苯胺法 2．试剂 1)邻甲苯胺冰乙酸溶液 2)1mol/L H2O2 溶液 (一)邻甲苯胺法 3．操作 粪便少许 + 邻甲苯胺冰乙酸2~3滴+ H2O2 2~3滴，混匀，立即观察。 (一)邻—甲苯胺法 4．结果判断 + + + + ：加入试剂后立即出现蓝黑色； + + + ：加入试剂后立即呈现蓝褐色； + + ：加入试剂后，浅蓝色 → 蓝褐色； + ：加入试剂后，浅蓝色 → 蓝色； - ：加入试剂2min后，仍不显色。 （二）匹拉米洞法 （氨基比林法） 1．原理 亚铁血红素催化H2O2产生[O]，使受色原匹拉米洞氧化而显紫色。 2．试剂 1) 50g/L 匹拉米洞乙醇溶液 2) 1mol/L H2O2溶液 3)冰乙酸 （二）匹拉米洞法 （氨基比林法） 3．操作 1）棉签法 用竹签挑取少许粪便 + 匹拉米洞乙醇溶液2~3d + 2~3d H2O2 +1d冰乙酸(旋转滴加) 2）试管法 试管加等渗盐水约3ml + 玉米粒大小粪便 → 混匀 → 煮沸→ 加试剂各1ml，混匀→观察 （二）匹拉米洞法 （氨基比林法） 4．结果判断 强阳性：立即显深紫色； 阳 性：紫色； 弱阳性：淡紫色； 阴 性；不显色（或出现其它颜色）。 （二）匹拉米洞法 （氨基比林法） 原理与上述方法相同，以四甲基联苯胺为显色基质，使用方便，可用于大规模普查或患者自检。 (三)干化学试纸法 操作： 粪便少许（绿豆大小）+ 5ml生理盐水或蒸馏水→混匀→试带浸入（约1秒）→取出30秒-60秒与标准板比色判断。 【注意事项】 1．试验前应素食3天，并禁用VitC、铁剂、铋剂等药物； 2．每天必做阴阳对照； 3．经常检查H2O2是否失效； 4．容器、玻片、棉签须清洁； 5.脓液过多可致假阳性——中性粒细胞含过氧化酶，可将标本少许加等渗盐水煮沸2min，冷却后再做试验。 （四）免疫学方法 为解决粪便隐血试验的特异性问题，当前发展最快的是免疫学方法，此类试验所用的抗体分为两类：一种为抗人血红蛋白抗体，另一种为抗人红细胞基质抗体。 免疫胶体金试纸法 原理、结果判断似尿hCG检验。