微生物染色技术（课堂PPT）.ppt

2021/3/29 2021/3/29 2021/3/29 2021/3/29 2、鞭毛的检查方法： 1）直接观察法： --电镜能直接观察到鞭毛，将细菌作成超薄切片，在电镜下直接观察。 --细菌经特殊的鞭毛染色法，使染料沉积在鞭毛的表面，增大其直径，在光镜下也可看到。 2021/3/29 2、鞭毛的检查方法： 1）直接观察法： 电镜能直接观察到鞭毛，将细菌作成超薄切片，在电镜下直接观察。 特殊染色法，使染料沉积在鞭毛上，增大其直径，在光学显微镜下也可看见。 2021/3/29 细菌鞭毛的电镜照片 鞭毛的光学显微镜照片 周生鞭毛 b. 极生鞭毛 c. 丛生鞭毛 2021/3/29 G G G G M M 丙 谷 DAB 丙 丙 DAB 谷 丙 2021/3/29 N-乙酰葡萄糖胺 N-乙酰胞壁酸 聚糖骨架 四肽侧链 L-丙氨酸 D-谷氨酸 二氨基庚二酸 D-丙氨酸 L-丙氨酸 D-谷氨酸 二氨基庚二酸 D-丙氨酸 2021/3/29 外膜 ①脂蛋白： 位于肽聚糖层和脂质双层之间，起连接作用，使外膜和肽聚糖构成一个整体。 ②脂质双层： 磷脂双层，内嵌外膜蛋白（out membrane protein OMP），具有不同的功能。如有的外膜蛋白为孔蛋白是小分子的通道；有的是噬菌体、性菌毛、细菌素的受体。 2021/3/29 ③ 脂多糖 (lipopolysaccharide， LPS)---是革兰氏阴性菌的内毒素；有以下三部分组成： ?类质A（Lipid A）： 类脂A：是细菌内毒素的毒性和生物学活性的主要组分，无种属特异性。是细菌内毒素的毒性和生物学活性的主要组分。 ?核心多糖(core polysaccharide)： 位于类脂A的外层，由己糖、庚糖、2-酮基-3-脱氧辛酸（KDO）、磷酸乙醇胺等组成。有种属特异性。 ?特异性多糖(specific polysaccharide)： 由数个至数十个低聚糖重复单位组成的多糖链。具有种特异性。革兰氏阴性菌的菌体抗原（O 抗原） 2021/3/29 脂多糖（LPS） 　是革兰阴性菌外膜的组成成分，包括类脂A、核心多糖和O特异性多糖三部分，又称为内毒素。类脂A是内毒素的主要毒性成分；核心多糖具有属特异性，同一属细菌的核心多糖的抗原性相同；特异性多糖即菌体O抗原，具有种的特异性。 概　念 2021/3/29 是革兰氏阴性细菌致病物质－内毒素的物质基础 与磷壁酸相似，也有吸附Mg+、Ca2+等阳离子以提高这些离子在细胞表面的浓度的用； 由于LPS结构的变化，决定了革兰氏阴性细胞表 面抗原决定簇的多样性； 具有控制某些物质进出细胞的部分选择性屏障功能。 脂多糖功能 2021/3/29 3、细菌细胞壁结构比较 特征 革兰氏阳性细菌 革兰氏阴性细菌 强度 较坚韧 较疏松 肽聚糖组成 肽聚糖、侧链、交联桥 肽聚糖、侧链 结构类型 三维空间结构 二维网状结构 厚度与层次 厚，20~80nm,可达50层 薄，5~10nm,仅1~3层， 含量 多，占细胞壁干重的50~80% 少，占细胞壁干重的5~20% 交联方式 侧链间以肽桥交联 侧链间以肽键交联 磷壁酸 有 无 脂蛋白 无 有 外膜 无 有 脂多糖 无 有 2021/3/29 4、细胞壁的功能 1）保持：细菌外形 2）保护：免受外界渗透压和有害物用质的损害 3）屏障：它具有相对通透性，对物质的进出，起着选择性分子筛的屏障作用。 4）抗原性：带有多种抗原决定簇，决定细菌菌体的抗原性。 5）与细菌某些染色反应和药物敏感性有关。 2021/3/29 （5）革兰阳性菌与革兰阴性菌细胞壁结构差异的生物学意义 染色性： 革兰阳性菌细胞壁结构致密，含脂类物质少，不易酒精脱色，革兰氏染色成蓝紫色（紫色）；反之革兰阴性菌染成红色； 抗原性： 革兰阳性菌的重要表面抗原之一是磷壁酸，革兰阴性菌的核心多糖和O抗原多糖是为重要表面抗原； 毒性： 革兰阴性菌的脂多糖即为内毒素（类脂A为内毒素主要成分），革兰阳性菌无此成分； 药物敏感性： 革兰氏阳性菌对青霉素，溶菌酶敏感，革兰阴性菌则否。 2021/3/29 革兰阳性菌 革兰阴性菌 细胞壁的关系 染色性 蓝紫色（紫色） 红色 细胞壁对酒精的通透性 抗原性 主要为磷壁酸 主要为外膜 细胞壁的化学组成不同 毒性 无内毒素 有内毒素 内毒素为阴性菌细胞壁成分 脂多糖 对青霉素的作用 有效 无效 青霉素作用部位为肽聚糖 五肽交联桥 对溶菌酶的作用 有效 无效 溶菌酶作