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预防医常用学实验技术原理与方法课程教学大纲 课程名称：预防医学常用实验技术原理与方法（The Experimental Technologies of Preventive Medicine?: Principles and Methods） 课程编码：1322016217 课程类别：专业课 总学时数：20 课内实验时数：0 学 分：1 开课单位：公共卫生学院环境与职业卫生学教研室 适用专业：预防医学 适用对象：五年制本科 一、课程的性质、类型、目的和任务 现代毒理学实验技术原理与方法是为适应预防医学专业学生掌握现代毒理学的知识需要而设置的一门专业选修课程。现代毒理学是一门与生命科学有着广泛联系和相互渗透的基础应用学科。现代毒理学研究方法和实验技术在药理学、营养与食品卫生学、环境卫生与劳动卫生学、临床医学、职业医学、法医学等领域有着极为广泛的应用。现代毒理学实验原理与方法旨在介绍现代毒理学常用实验技术的基本原理、操作方法、必威体育精装版进展以及这些实验技术的具体应用。 通过本课程的学习，一方面为进一步学习劳动卫生学、环境卫生学、营养与食品卫生学等预防医学专业课程打下必要的毒理学基础；另一方面，为将来卫生防疫实际工作中毒理学知识的应用提供基本知识和技能。 二、本课程与其它课程的联系与分工 本课程宜从四年级第一学期开始，以确保学生学习本课程具有所需要的现代毒理学专业知识。 三、教学内容及教学基本要求 [1]表示“了解”；[2]表示“理解”或“熟悉”；[3]表示“掌握”； △表示自学内容；○表示略讲内容； 第一章 离体器官的灌流技术 离体肺灌流技术 仪器装备[3]；灌流液体[3]；通气气体[3]；操作步骤[3]；互理学应用举例[3]；注意事项 [2]； 离体心脏灌流技术[3]； 离体肝脏灌流技术[3]； 人胎盘灌流技术[2]； 重点：离体心脏灌流技术；离体肝脏灌流技术 难点：离体心脏灌流技术；离体肝脏灌流技术 教学手段：多媒体教学 教学方法：讨论教学法 第二章 细胞毒理学研究方法 第一节 细胞培养 培养细胞生物学[2]；细胞培养技术[3]；常用几种细胞的培养[3]； 第二节 培养细胞的生物特征与检测 培养细胞的常规检查[3]；细胞染色体分析[2]；培养细胞恶性转化[2]；大鼠气管上皮细胞转化试验[2]； 重点：细胞培养技术与培养细胞的常规检查； 难点：细胞培养技术 教学手段：多媒体教学 教学方法：讨论教学法 思考题： 1.细胞培养技术与注意事项？ 2.培养细胞的常规检查方法？ 第三章 细胞凋亡常用的研究方法 第一节 概述[1] 第二节 细胞凋亡的形态学评价 倒置显微镜和光学显微镜观察法[3]；荧光显微镜观察法[3]；透射电子显微镜观察[2]； 细胞凋亡时DNA的改变 DNA Ladder测定[2]；大分子染色体DNA片段的测定[2]；凋亡细胞DNA含量的流式细胞仪分析[1]；DNA 片段原位标记[1]；调亡细胞断裂核小体DNA的免疫化学测定[1]； 重点：细胞凋亡的形态学观察 难点：细胞凋亡的形态学观察 教学手段：多媒体教学 教学方法：讨论教学法 思考题： 1、倒置显微镜、光学显微镜与荧光显微镜观察细胞凋亡的方法与注意事项？ 第四章 亚细胞组分的制备与功能检测 第一节 细胞膜的制备 红细胞膜的分离与鉴定[3]；肝细胞膜的分离与鉴定[3]；脑突触体膜的分离制备[2] 第二节 肾小管和小肠上皮细胞刷状缘膜的制备 肾小管上皮细胞刷状缘膜的分离与鉴定[2]；小肠上皮细胞刷状缘膜的分离与鉴定[2]； 第三节 线粒体的分离制备 脑线粒体的分离及鉴定[3]；心脏线粒体的分离制备[3]；肝脏线粒体的分离制备[3]；肾脏线粒体的分离制备[2]； 第四节 微粒体的制备及微粒体酶第的测定 微粒体的分离制备[3]；微粒体混合功能氧化酶系活性的测定[1] 第五节 溶酶体和过氧化物酶体的分离制备 原理[2 ]；仪器与试剂[2 ]；分离技术[2 ]；溶酶体纯度测定[1 ]； 重点：细胞膜的分离制备；线粒体的分离制备 难点：细胞膜的分离制备；线粒体的分离制备 教学手段：多媒体教学 教学方法：讨论教学法 思考题： 1、试述红细胞膜的分了与鉴定方法？ 2、肝脏线粒体的分离制备方法？ 第五章 蛋白质（酶）的分离与纯化 第一节 蛋白质（酶）的粗分离 细胞破碎和蛋白质（酶）的溶剂提取方法[3]；盐析方法[3 ]；有机溶剂沉淀方法[3]； 第二节蛋白质（酶）的层析纯化 吸附层析方法[2 ]；离子交换层析方法[2 ]；凝胶过滤层析方法[2 ]；亲和层析方法[2 ]；金属螯合层析方法[2 ]。 第三节 电泳技术分离纯化蛋白质（酶） 醋酸纤维素电泳[3 ]；聚丙烯酰胺凝胶电泳[3]。 第四节 蛋白质受体功能测定 受体放射分析法[3 ]；基因重组检测系统[3 ]； 第五节 蛋白加合物测