第十一章经典液相色谱法与检测技术.pptVIP

第二节 柱色谱法 判断物质极性强弱时，可以参考以下规律： ①基本母核相同，分子中极性基团的极性越大、极性基团越多，则分子的极性就越大； ②分子中双键越多、共轭双键链越长，极性越大； ③分子式相同，能形成分子内氢键的分子极性要弱； ④在同系物中，分子量越大，分子的极性越小。 2. 被测物质的结构与性质 一、液—固吸附柱色谱法 * 现在三十页，总共七十四页。 第二节 柱色谱法 3. 流动相性质 常用溶剂的极性由小到大的顺序为： 石油醚＜环己烷＜四氯化碳＜苯＜甲苯＜乙醚＜三氯甲烷＜乙酸乙酯＜正丁醇＜丙酮＜乙醇＜甲醇＜水 一、液—固吸附柱色谱法 * 现在三十一页，总共七十四页。 第二节 柱色谱法 （1）吸附剂的选择：分离极性大的物质，一般选用吸附活性小的吸附剂；反之亦然。即使得吸附剂与被分离物质间存在适宜强度的吸附作用力。 4. 吸附剂和流动相的选择 一、液—固吸附柱色谱法 （2）流动相的选择： “相似相溶”原则进行选择。 * 现在三十二页，总共七十四页。 第二节 柱色谱法 被测物质的极性、吸附剂活性和流动相极性之间的关系示意图 一、液—固吸附柱色谱法 * 现在三十三页，总共七十四页。 一般用亲水性吸附剂（如：硅胶）作色谱分离时，若分离物极性较小，应选择何吸附剂和洗脱剂？ 分离物极性小，形成氢键的能力弱，所以宜选用吸附活性大（含水量低即活性级数低）的吸附剂，这样分离物和吸附剂间才能形成一定强度的氢键，使固定相对其产生适宜的吸附作用；被分离物极性小，根据“相似相溶”原则宜选用极性小的洗脱剂。 案 例 分 析 第二节 柱色谱法 * 现在三十四页，总共七十四页。 第二节 柱色谱法 二、液—液分配柱色谱法 1. 固定相 由载体及涂渍或键合在载体表面的固定液组成。 载体 　　是一种惰性物质，主要起负载或支撑固定液的作用。 固定液 　正相色谱：强极性溶剂，如水、甲醇等。 　反相色谱：非极性或弱极性溶剂，如液体石蜡等。 * 现在三十五页，总共七十四页。 第二节 柱色谱法 2. 流动相 正相色谱：极性小于固定相的醇类、酮类、酯类、卤代烷、苯或其混合物。 反相色谱：水、稀醇等极性溶剂。 应用 各类化合物的分离，特别是亲水性物质。 二、液—液分配柱色谱法 * 现在三十六页，总共七十四页。 分配色谱分离时，已知某混合物中A、B二组分在两相中的分配系数 分别为315、450，请您分析，进行柱色谱分离时二组分的出柱顺序。 课 堂 互 动 二、液—液分配柱色谱法 第二节 柱色谱法 * 现在三十七页，总共七十四页。 第二节 柱色谱法 1. 固定相　离子交换树脂 交联度：离子交换树脂中所含交联剂的量。 　用于衡量离子交换树脂的选择性，交联度大，树脂的网状结构紧密，网眼小，选择性好。 交换容量：实验条件下，每克干树脂真正参加交换的活性基团数。用于衡量离子交换树脂的交换能力，交换容量大，树脂的交换能力强。 三、离子交换柱色谱法 * 现在三十八页，总共七十四页。 第二节 柱色谱法 2. 流动相 　　水为溶剂的缓冲溶液。 应用 去离子水的制备，天然药物化学成分的分离。 三、离子交换柱色谱法 * 现在三十九页，总共七十四页。 第二节 柱色谱法 四、凝胶柱色谱法 1. 固定相选择时应使试样的相对分子量落入凝胶的相对分子质量范围内。 （1） 排斥极限：化合物的相对分子质量达到某一数值后就不能渗透进入凝胶的任何孔穴，这一数值称~。 （2）全渗透点：化合物的相对分子质量小于某一数值后就能进入凝胶的所有孔穴，则这一数值称~。 （3）相对分子质量范围：排斥极限与全渗透点之间的相对分子质量范围称为~。 第二节 柱色谱法 * 现在四十页，总共七十四页。 第二节 柱色谱法 应用 　　天然药物化学和生物化学的研究，水溶性高分子化合物如蛋白制剂等的分析。 2.流动相 一般水溶性试样选择水溶液为流动相，而非水溶性试样则选择四氢呋喃、氯仿、甲苯等有机溶剂为流动相。 四、凝胶柱色谱法 * 现在四十一页，总共七十四页。 第二节 柱色谱法 五、柱色谱法的应用 例如采用柱色谱法中的凝胶色谱法，以葡聚糖凝胶为固定相，1mol/L的NaCl为流动相，可以将分子量存在差异的葡萄糖和淀粉进行分离。 例如采用分配色谱法以硅胶为固定相，水饱和的乙酸乙酯为流动相，可以将洋地黄毒苷、羟基洋地黄毒苷、异羟基洋地黄毒苷三种单体进行分离等。 * 现在四十二页，总共七十四页。 点滴积累 1. 硅胶（或氧化铝）活性级数高，活性低，吸附能力弱。 2. 吸附柱色谱法：被分离组分与固定相间的吸附作用力适中；组分与流动相“相似相溶”。 3.分配柱色谱法：固定相与流动相极性