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流动相（载气）种类 流动相的种类要视检测器种类确定。 常用的有氢气（热导用）、氮气（氢火焰用）、氦气（均可用，但价格较高）。 氢气和氦气适合于快速分析。 氮气做载气峰型较好，柱效较高。 现在六十二页，总共九十页。 三、色谱定性与定量方法 现在六十三页，总共九十页。 分子扩散项 B/u项 其中 B=2γDg 弯曲因子 扩散系数 现在三十页，总共九十页。 分子扩散项 由于分子的纵向扩散造成的色谱峰扩展。即由于试样组分被载气带入色谱柱后，是以塞子的形式存在于色谱柱的很小一段空间中，由于在塞子前后存在浓度梯度，因此使运动着的分子产生纵向扩散，引起色谱峰扩展。 现在三十一页，总共九十页。 传质阻力项 由气相传质阻力和液相传质阻力两项组成 现在三十二页，总共九十页。 气相传质阻力项Cg?u 试样组分从气相移动到固定相表面的过程中，由于质量交换过程需要一定时间（即传质阻力）而使分子有滞留倾向。在此过程中，部分组分分子随流动相向前运动，发生分子超前，引起色谱峰扩展。 容量因子 现在三十三页，总共九十页。 液相传质阻力项CL ?u 试样组分从固定相表面移动到固定相内部再回到表面的过程中，由于质量交换过程需要一定时间（即传质阻力）而使分子有滞留倾向。在此过程中，部分组分分子先离开固定相表面，发生分子超前，引起色谱峰扩展。 液相扩散系数 液膜厚度 现在三十四页，总共九十页。 气相色谱中的速率方程 现在三十五页，总共九十页。 速率方程给我们的什么启示？ 为柱型的研究和发展提供理论依据 为操作条件的选择提供理论指导 为色谱柱的填充提供理论指导 现在三十六页，总共九十页。 对柱型研究和发展的影响（1） A=0? Golay1957年提出毛细管柱的概念（opentube） 毛细管柱A=0，H=B/u+Cu H↓，N↑，分离能力大大提高 现在三十七页，总共九十页。 对柱型研究和发展的影响（2） B=0? 溶质在液体中的扩散系数DL≈10-5cm2/s 溶质在气体中的扩散系数Dg≈10-1cm2/s DL 《 Dg 当采用液体作流动相时 B→0 液体作流动相时可用更细的固定相，A ↓ HPLC柱效比GC要高2~3个数量级 现在三十八页，总共九十页。 操作条件对柱效的影响（1） H-u 曲线 现在三十九页，总共九十页。 载气线速度（流速）的影响 最佳流速：u=(B/C)1/2 实用最佳流速：比最佳流速更快 A与流速无关 B/u：当流速小时，对H的大小起主导作用 Cu：当流速大时，对H的大小起主导作用 现在四十页，总共九十页。 容量因子k的影响 不同组分k不同，测出的柱效不同 在气相传质阻力相中，k↑ ，Cg↑ 理论上说k越小柱效越高，实际不可取 在液相传质阻力相中，k ↑ ，Cl先↑， 后↓当k=1时，最大。 希望k在一个合适的范围内，通过改变柱温、固定相、柱型参数等可实现。 现在四十一页，总共九十页。 柱温的影响 间接影响、十分复杂 对k影响，对扩散系数影响，从而对柱效产生影响，但影响情况难以判断 现在四十二页，总共九十页。 对色谱柱的填充提供理论指导（1） 柱径：柱径越小，固定相越难填充均匀。 柱长L：柱长增加，总塔板数增加，但分离时间将增加。 固定相粒径dp：根据速率方程，粒径减小，A项减小，C项减小，柱效增加。但粒径太小，不易填充均匀，A项又增大。 现在四十三页，总共九十页。 对色谱柱的填充提供理论指导（2） 液膜厚度df：从柱效角度考虑，液膜越薄，柱效越高（根据速率方程），但允许的进样量减小。 现在四十四页，总共九十页。 （1）几个概念——选择性系数α 定义与相对保留值(ri,s)基本相同 不同之处在于选择性系数是两个相邻峰的调整保留值之比（后峰比前峰，α≥1），而不是被测物与标准物质的调整保留值之比（可小于1） 它是评价固定液选择性的指标。选择性系数越大，该柱对此相邻峰的分离越好。 现在四十五页，总共九十页。 几个概念——有效塔板数N有效 在气相色谱中，通常用有效塔板数N有效和有效塔板高度H有效来评价柱子的分离效能，它扣除了死体积对分离的影响，更好地反映了柱子的实际分离效能。 柱效越高，该柱的分离能力越好。 现在四十六页，总共九十页。 几个概念——分离度R R越大，说明两组分分离得越好。 由于该定义综合了色谱动力学和热力学因素，可作为色谱柱的总分离效能指标。 现在四十七页，总共九十页。 (2) 色谱分离基本方程（Purnell方程） 公式推导 现在四十八页，总共九十页。 （3）色谱分离基本方程的启示 要改善物质对的分离（提高R），即