医学遗传学实验指导.pdf

医学遗传学 实验指导 内蒙古医学院遗传学教研室 目 录 验一 人体外周血淋巴细胞培养及染色体标本制备 实验二 小鼠骨髓细胞染色体标本的制备 实验三 人类染色体 G 显带技术 实验四 人类染色体 C 显带技术 实验五 核仁形成区银染技术 实验六 人类染色体 G 显带核型分析 实验七 X 染色质标本的制备 实验八 姐妹染色单体交换 实验九 微核检测技术 实验十 ABO 血型的测定及其基因频率的计算 实验十一 苯硫脲尝味试验及其基因频率的计算 实验十二 人类皮纹分析 实验十三 遗传咨询 实验十四 人类基因组 DNA 的提取 实验十五 聚合酶链式反应（ PCR） 实验十六 DNA 的琼脂糖凝胶电泳 实验十七 PCR-RFLP 技术 《医学遗传学》实验须知 一、医学遗传学实验目的和要求 医学遗传学实验课是医学遗传学课程的重要内容。 实验课有助于加深和巩固基础理论知 识，并进一步了解和掌握本学科的基本实验内容和操作技能。 在培养学生分析问题、 综合问 题和解决问题能力方面具有重要作用。为此，要求学生做到以下几点： 1、实验课前做好预习，明确实验目的、实验原理。 2、复习有关理论内容。 3、熟悉实验的主要步骤。 4、初步估计和判定实验的可能结果。 二、实验操作过程中的注意事项 1、认真操作，仔细观察和综合分析实验所出现的现象与结果并及时记录。 2、如果实验结果与理论结果不一致，须及时进行科学分析，判断结果的可靠性，寻找 出现误差的原因。 3、各种实验试剂用后放回原处，瓶盖封严，轻拿轻放。 4、使用微量加样器时，一定调整好取用量，按使用要求操作。 5、实验室应保持肃静，注意清洁卫生，实验中用过的废弃物品要及时清理，避免堵塞 下水管道。 三、实验后的注意事项 1、实验后，整理清洁所用仪器、设备，注意放回原位，以备下次使用。 2、如有仪器损坏，要及时填写破损报告，并报告老师。 3、离开实验室前，检查并关闭门、窗、水、电。 四、实验室的意外处理 实验室如遇着火、烫伤等意外事件发生，必须镇静做紧急处理，并立即报告老师。 1、着火：如遇酒精灯推倒或其它原因着火，首先将一切易燃品移至远处，然后用水扑 灭或者切断电源。 2、火伤：皮肤被火灼伤，用烫伤软膏涂抹，如伤势较重，立即送医院治疗。 3、如有毒药品泼溅到皮肤上，如 EB ，同位素等，应用大量清水进行清洗，必要时，去 医院处理。 4、割伤出血：遇玻璃割伤出血，可用碘酒或红药水消毒后，用纱布包扎。如有玻璃留 在伤口，处理前应先取出。 实验一 人体外周血淋巴细胞培养及染色体标本制备 【目的要求】 1、初步掌握人体外周血淋巴细胞短期培养的基本方法。 2、初步掌握人体外周血淋巴细胞染色体标本制备的技术方法 【实验原理】 人体外周血淋巴细胞培养 ( 人体末梢血、 微量全血短期培养 ) 及其染色体标本制备是国内 外研究显示染色体最常用和效果最好的方法。 此方法取材方便，用血量少， 操作简便， 现已 广泛应用于基础医学、临床医学的研究和染色体病的诊断等。 人体外周血中的小淋巴细胞，是已分化、处于 G0 期的细胞，几乎不具有分裂增殖能力。 在离体血培养细胞中很难找到正在分裂的淋巴细胞， 因此， 需采用刺激细胞增殖的