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第六章 DNA重组的操作;外源DNA;;第一节 DNA的体外重组;;;;第一节 DNA的体外重组;第一节 DNA的体外重组;第一节 DNA的体外重组;第一节 DNA的体外重组;第一节 DNA的体外重组;;;;第一节 DNA的体外重组;第一节 DNA的体外重组;第一节 DNA的体外重组;;第一节 DNA的体外重组;第一节 DNA的体外重组;;第一节 DNA的体外重组;第一节 DNA的体外重组;;第一节 重组DNA分子的构建;第一节 DNA的体外重组;第一节 DNA的体外重组;第一节 DNA的体外重组;第一节 DNA的体外重组;第一节 DNA的体外重组;第一节 DNA的体外重组;;;1. 粘性末端连接
(1)两端具有相同粘末端的DNA分子之间的连接
(2)两端具有不同粘性末端的DNA分子之间的连接
2. 平头末端连接
(1)直接连接
(2)人工加尾形成 “粘性末端”
a)同聚加尾法
b)衔接物连接
c) DNA接头连接法
3. PCR产物的连接
(1)在引物的5’端设计酶切位点
(2)与T载体直接连接;;第一节 DNA的体外重组;第一节 DNA的体外重组;第一节 DNA的体外重组;
3. 防止载体自身环化连接
(1)提高插入片断的用量
连接反应体系中,插入片断比载体多10倍以上。
(2)用碱性磷酸酶处理载体
载体切口的5’磷酸被除去,不能自我连接。;三、载体和外源DNA插入片段的连接结果;;;;9、有时候读书是一种巧妙地避开思考的方法。8月-218月-21Monday, August 2, 2021
10、阅读一切好书如同和过去最杰出的人谈话。17:11:1317:11:1317:118/2/2021 5:11:13 PM
11、越是没有本领的就越加自命不凡。8月-2117:11:1317:11Aug-2102-Aug-21
12、越是无能的人,越喜欢挑剔别人的错儿。17:11:1417:11:1417:11Monday, August 2, 2021
13、知人者智,自知者明。胜人者有力,自胜者强。8月-218月-2117:11:1417:11:14August 2, 2021
14、意志坚强的人能把世界放在手中像泥块一样任意揉捏。02 八月 20215:11:14 下午17:11:148月-21
15、最具挑战性的挑战莫过于提升自我。。八月 215:11 下午8月-2117:11August 2, 2021
16、业余生活要有意义,不要越轨。2021/8/2 17:11:1417:11:1402 August 2021
17、一个人即使已登上顶峰,也仍要自强不息。5:11:14 下午5:11 下午17:11:148月-21
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