21_微生物的实验室培养.pptxVIP

;专题2 微生物的培养与应用;(一) 概念、特点： 个体难以用肉眼观察的一切微小生物之统称。微生物包括细菌、病毒、真菌、和少数藻类等。（但有些微生物是肉眼可以看见的，像属于真菌的蘑菇、灵芝等。） 结构都相当简单,个体多数十分微小.通常要用光学显微镜或电子显微镜才能看到，有的甚至没有细胞结构.且体内一般不含有叶绿素.不能进行光合作用. ;微生物的类群;细菌;球菌;细菌;细菌 *细胞壁;芽孢;菌 落;几种菌落及其形态;菌 落;细菌的营养类型 ;放线菌;链霉素、土霉素、四环素、 氯霉素、红霉素、庆大霉素 ;;;;生殖;病毒的结构;病毒;SARS病毒、 禽流感病毒;朊病毒（蛋白质病毒）;1.培养基内所含的基本物质;：凡是能为微生物提供所需碳元素的营养物质。;①无机氮源：N2、NH4+、NO3-、NH3等。;(1)特殊营养物质---- ? 如：培养乳酸杆菌需要在培养基中添加维生素 (2)pH值 如:培养霉菌需酸性、培养细菌需中性或微碱性 (3)氧气的含量 如:培养厌氧微生物时需要提供无氧的条件;练习1（多项选择）;(1)按物理状态分 液体培养基 固体培养基;固体培养基：菌落，菌苔;液体培养基：;半固体培养基：;3.分类;连线下列选择培养基;伊红-美蓝培养基 金属光泽深紫色菌落;3.分类;血清中含有： ①多种蛋白质（白蛋白、球蛋白、铁蛋白等） ②多种金属离子； ③激素； ④促贴附物质，如纤粘蛋白、冷析球蛋白、胶原等。 ⑤各种生长因子 ⑥转移蛋白 ⑦不明成分;（三）无菌技术;（2）灭菌;干热灭菌 160－170℃ ；1－2h; ;四、实验操作;1．计算、称量 2．溶化 3．调pH：　pH7．6　 4．过滤：这一步可以省去。 5．分装：分装过程中注意不要使培养基沾在管口或瓶口上，以免沾污棉塞而引起污染。分装三角烧瓶的量以不超过三角烧瓶容积的一半为宜。 6．加塞 7．包扎;8．灭菌: 将50ml培养基用玻棒转移至三角锥瓶中，塞上棉花塞，包上牛皮纸，再放入高压蒸气灭菌锅，在压力为100kPa、温度为121℃，灭菌15～30min。将培养皿用旧报纸包裹，放入干热灭菌箱内，在160～170 ℃下灭菌2h。;倒平板技术;倒平板技术;倒平板技术;倒平板技术; 9．倒平板: 待培养基冷却到50 ℃左右时，在酒精灯附近倒平板。（倒平板操作见课本）2d后观察平板，无杂菌污染才可用来接种. 10．无菌检查： 将灭菌的培养基放入37℃的温室中培养24—48小时，以检查灭菌是否彻底。; 1.培养基灭菌后，需要冷却到50 ℃左右时，才能用来倒平板。你用什么办法来估计培养基的温度？; 2.为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰？;3.平板冷凝后，为什么要将平板倒置？; 4.在倒平板的过程中，如果不小心将培养基溅在皿盖与皿底之间的部位，这个平板还能用来培养微生物吗？为什么？;二、实验操作;三、课题延伸：菌种的保藏;倒平板;1.培养基灭菌后，需要冷却到50 ℃左右时，才能用来倒平板。你用什么办法来估计培养基的温度？;3.平板冷凝后，为什么要将平板倒置？;第四课时;;问题讨论;2.在灼烧接种环之后，为什么要等其冷却后再进行划线？;2.稀释涂布平板法:;问题讨论;涂布平板操作;返回;(2)碳源;(3)氮源;思考:;?;思考2;练习2:; 4.某学校打算开辟一块食用菌栽培基地,以丰富学生的劳动技术课内容,首先对食用菌实验室进行清扫和消毒处理,准备食用菌栽培所需的各种原料和用具,然后从菌种站购来各种食用菌菌种.请回答以下问题:;(3)将配制好的培养基转移到锥形瓶中,加棉塞后包上牛皮纸并用皮筋勒紧放入 中灭菌,压力为 ,温度为 ,时间 ,灭菌完毕拔掉电源,待锅内压力 ,将试管取出. (4)使用高压蒸汽灭菌锅时注意,先向锅内倒入 ,把锅内水加热煮沸并将基中原有冷空气彻底排除后将锅密闭. (5) 从一支试管向另一支试管接种时注意,接种环要在酒精灯 焰灭菌.并且待接种环 后沾取菌种,试管口不能离开酒精灯火焰附近,将接种的试管放入 ℃冰箱中保藏.;病毒的结构;SARS冠状病毒、 禽流感病毒;朊病毒（蛋白质病毒）;病毒的增殖：;细菌的外形与大小;芽孢;菌落：;菌落;细菌的营养类型 ;放线菌;链霉素、土霉素、四环素、 氯霉素、红霉素、庆大霉素 ;真 菌;;生殖;固体培养基：菌落;液体