有哪些信誉好的足球投注网站- 1、本文档共40页，可阅读全部内容。
- 2、有哪些信誉好的足球投注网站（book118）网站文档一经付费（服务费），不意味着购买了该文档的版权，仅供个人/单位学习、研究之用，不得用于商业用途，未经授权，严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等，侵权必究。
- 3、本站所有内容均由合作方或网友上传，本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺！文档内容仅供研究参考，付费前请自行鉴别。如您付费，意味着您自己接受本站规则且自行承担风险，本站不退款、不进行额外附加服务；查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档，您可以点击 这里二次下载。
- 4、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等，请点击“版权申诉”（推荐），也可以打举报电话：400-050-0827(电话支持时间：9:00-18:30)。
- 5、该文档为VIP文档，如果想要下载，成为VIP会员后，下载免费。
- 6、成为VIP后，下载本文档将扣除1次下载权益。下载后，不支持退款、换文档。如有疑问请联系我们。
- 7、成为VIP后，您将拥有八大权益，权益包括：VIP文档下载权益、阅读免打扰、文档格式转换、高级专利检索、专属身份标志、高级客服、多端互通、版权登记。
- 8、VIP文档为合作方或网友上传，每下载1次， 网站将根据用户上传文档的质量评分、类型等，对文档贡献者给予高额补贴、流量扶持。如果你也想贡献VIP文档。上传文档
查看更多
1、实验目的 ：
学习与掌握碱裂解法抽提大肠杆菌质粒DNA的原理与方法
;2、实验原理：
碱裂解法抽提质粒DNA是基于染色体DNA与质粒DNA的变性与复性的差异而达到分离的目的。;3、实验步骤及各步注意事项;2. 加100μl的溶液 I，使菌体充分悬浮，室温静置3min。
注意点：必须充分混匀至看不见沉淀，可用移液器吹打或者用混匀器振荡。;3. 加入200μl溶液II，温和上下颠倒2-3次，溶液转变为澄清透明。
注意点：不可剧烈振荡。;4. 加入150μl溶液III，上下颠倒混匀数次，静置2-3min。
注意点：不可剧烈振荡，此时应出现白色沉淀。
5. 12000 rpm离心5min。;6. 取上清，加等体积（400μl）的酚/氯仿/异戊醇，充分混匀，室温，12000rpm离心5min。
注意点：酚氯仿有腐蚀性，盖严离心管盖，避免接触酚氯仿，如接触立即用水冲洗。;7. 吸上层水相，再加1ml(约2.5倍体积）预冷的无水乙醇，混匀。
注意点：一定避免吸到中间沉淀及下层酚氯仿。宁可损失一定上清。
;8. 4℃，12000rpm离心10min。
9. 弃上清，加入0.5 ml 70％乙醇，4℃，12000 rpm离心5 min。
10. 弃上清，沉淀自然干燥10 min后，加20μl无菌水溶解。
注意点：弃上清时尽量将酒精倾倒干净，但注意不要将沉淀弃去。;4. 加入150μl溶液III，上下颠倒混匀数次，静置2-3min。
注意点：不可剧烈振荡，此时应出现白色沉淀。
5. 12000 rpm离心5min。
文档评论（0）