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第一节 液相沉淀反应;一、絮状沉淀反应;二、环状沉淀试验; 方法学评价:
该方法操作简便、快速。敏感性低(3-20mg/L),只能定性。
主要用于鉴定微量抗原,如鉴定血迹,诊断炭疽。
现在很少使用。;第二节 凝胶内的沉淀试验;凝胶内的沉淀试验类型;一、单向扩散试验;一、单向扩散试验;单向琼脂扩散试验;2.技术要点:将抗体或抗血清混入0.9%的琼脂糖内,未凝固前倾注呈平板,凝固后在琼脂板上打孔(直径约3-5mm),孔中加入抗原溶液,放室温或37oC 让其向四周扩散,24~48后可见孔周围出现沉淀环。
;3.数据处理;3.数据处理;4.临床应用;二、双向扩散试验;2.技术要点;;3.方法评价;4.临床应用;;;;;4.用于抗体效价的滴定
双向扩散技术是抗血清抗体效价滴定的常规方法。固定抗原的浓度,稀释抗体;或者抗原、抗体双方皆作不同的稀释,经过自由扩散,形成沉淀线。出现沉淀线的最高抗体稀释度为该抗体的效价。;第三节 免疫电泳技术;一、免疫电泳;其基本原理是将蛋白质抗原在琼脂糖凝胶上进行电泳,样品中不同的抗原成分因所带电荷、分子量及构型不同,电泳迁移率各异,而被分离成肉眼不可见的若干区带。停止电泳后,在与电泳方向平行的琼脂槽内加入相应抗体进行双向免疫扩散。分离成区带的各种抗原成分与相应抗体在琼脂中扩散后相遇,在二者比例合适处形成肉眼可见的弧形沉淀线。 ;血浆蛋白各区带位置示意图;根据沉淀线的数量、位置和形状,与已知的标准(或正常)抗原、抗体形成的沉淀线比较,即可对样品中所含成分的种类及其性质进行分析、鉴定。;二、对流免疫电泳;;三、火箭电泳;;四、免疫固定电泳;Thanks!
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