生化分离与纯化技术 生物碱的分离纯化 生物碱分离.pptVIP

LOGO 乌梅中生物碱分离 乌梅中生物碱分离 产品简介 1 实训目标 2 实训原理 3 实训试剂与设备 4 生产实训 5 产品简介 （一）生物碱简介 生物碱（alkaloid）是存在于自然界（主要为植物，但有的也存在于动物）中的一类含氮的碱性有机化合物，有似碱的性质，所以过去又称为赝碱。大多数有复杂的环状结构，氮素多包含在环内，有显著的生物活性，是中草药中重要的有效成分之一。具有光学活性。有些不含碱性而来源于植物的含氮有机化合物，有明显的生物活性，故仍包括在生物碱的范围内。而有些来源于天然的含氮有机化合物，如某些维生素、氨基酸、肽类，习惯上又不属于“生物碱。 2、产品结构式： 乌梅中生物碱分离 产品简介 　　乌梅为蔷薇科植物梅 的近成熟果实熏制或烘制而成。广 植于南北各省区。乌梅味酸、涩 ,含有丰富的营养保健物质 ,如单宁、钙、铁、锌、硒等多种微量元素和多种维生素。能生津止渴 ,开胃舒郁。 生物碱具环状结构，难溶于水，与酸可以形成盐，有一定的旋光性和吸收光谱，大多有苦味。呈无色结晶状，少数为液体。生物碱有几千种，由不同的氨基酸或其直接衍生物合成而来，是次级代谢物之一，对生物机体有毒性或强烈的生理作用。 乌梅中生物碱分离 实训目标 1.学会利用溶剂萃取的方法对目的产物进行提纯。 2.掌握利用有机溶剂结晶法，制备生物碱精品。 乌梅中生物碱分离 实训原理 乌梅经80%乙醇浸提后用氯仿萃取浓缩,转入水相通过大孔阳离子交换树脂柱,洗脱液用氯仿萃取浓缩后,石油醚溶解进行重结晶。 实训试剂与设备 一、试剂及药品 乌梅、阳离子交换树脂、丙酮、3%HCl溶液、铁氰化钾、HCl溶液、AgNO3溶液、氯仿溶液、乙醇溶液、石油醚溶液（所用试剂均为分析纯） 二、实验器材 索氏抽提器、旋转蒸发仪、组织捣碎机、 电子天平等以及常规有机溶剂 萃取用玻璃器皿。 乌梅中生物碱分离 生产实训 一、生产前准备 1、树脂的预处理 将新的树脂加适量的丙酮在索氏抽提器中抽提2h，除去有机物，将树脂取出晾干，蒸馏水湿法装柱，柱子先用3%HCl淋洗，除去Fe3+，铁氰化钾检查不变色后，用3%NaOH溶液淋洗，使树脂变成OH型，蒸馏水冲洗至弱碱性，用HCl 溶液冲洗至酸性pH=3左右，使之转变为 H+型，最后用蒸馏水冲至中性，且AgNO3 检验无Cl2为止，准备上样。流速控制在1ml/min左右。 2、样品的预处理 将捣碎的乌梅肉20g左右置于圆底烧瓶中，加入80%乙醇120 ml 浸泡过夜后，回流提取2次，每次1h，过滤，滤液用NaOH溶液调至pH10，使生物碱变为游离状态后，用氯仿萃取，在萃取的氯仿液中加入稀盐酸，使生物碱变为盐酸盐进入水相，除去有机相，待分离。 乌梅中生物碱分离 生产实训 二、生产操作 1、生物碱的富集与分离 将上述预处理好的酸水液通过处理好的阳离子交换树脂柱，先用蒸馏水洗至中性，再分别用50%(50ml)、80%(50 ml)、100%(150 ml)的乙醇溶液淋洗，改用丙酮洗至流出液遇NH3·H2O不变色后，将树脂倒入烧杯中，加入NH3·H2O∶丙酮=1∶6 密封、浸泡过夜，挥去NH3·H2O 后，再上柱，用丙酮洗脱，将洗脱液合并后旋转蒸发，除去丙酮，然后用氯仿萃取，合并萃取液旋转蒸发得粗碱。 2、生物碱结晶 粗碱用石油醚溶解，溶于石油醚部分重结晶得黄色片状晶体，将其升华纯化得到白色片状晶体Ⅰ；不溶于石油醚部分直接升华，得到白色针状晶体Ⅱ。 乌梅中生物碱分离