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职业教育医学检验技术专业教学资源库 生物化学检验技术 载脂蛋白ApoAI和ApoB检测 BASIC CLINICAL LABORATORY MEDICINE 2 载脂蛋白的种类与功能 载脂蛋白是非均一的蛋白质,是脂类与蛋白质的复合体。 种类:主要有A、A1、B、C、E等。 功能: 它参与组织或细胞间脂类的运输和重分配; 维持脂蛋白颗粒的结构; 能与细胞膜上特异受体结合, 影响脂类的摄取。 血清ApoAI和ApoB测定方法 参考方法 目前尚无公认的方法 临床实验室测定方法 早期多采用火箭免疫电泳测定血清中ApoAI 、ApoB的含量,以后相继出现包括RIA、ELISA、免疫浊度法(INA和ITA)等。 建议: 免疫浊度法作为临床实验室测定血清ApoAI、ApoB的常规方法,首选ITA法,其次为INA法。 血清ApoAI及B测定 原理 血清ApoAI或ApoB与试剂中ApoAI或ApoB抗体相结合,在一定条件下形成不溶性免疫复合物,使溶液混浊,混浊度与ApoAI或ApoB的量成正比,即浊度与吸光度成正比。 注意事项 1.购买效价高、单价特异的ApoAI、ApoB抗血清。 2.为了准确测定ApoAI、ApoB,必须作标准曲线。 3.免疫透射比浊法应以多点(5~7点)定标,按曲线回归运算。 加入物(ml) 空白管 标准管 测定管 蒸馏水 0.02 标准液 0.02 血清 0.02 抗体 3.0 3.0 3.0 操作 混匀,37℃水浴保温5分钟,340 nm比色,空白管调零,读取标准管及测定管吸光度。 血清ApoAI(g/L )= A测/A标 × 1.02 计算 血清ApoB (g/L )= A测/A标× 0.56 参考值: ApoAI 1.40~1.45 g/L。 Apo B 0.80~1.00g/L ApoAI/ Apo B :1.0-2.5 一般情况下,血清ApoAI可以代表HDL水平,与HDL-C呈明显正相关。冠心病患者、脑血管患者ApoAI偏低。 临床意义 Apo AⅠ是HDL的主要结构蛋白, Apo B 是LDL的主要结构蛋白,因此,Apo AⅠ和Apo B 可直接反映HDL和LDL的含量。但在某些病理情况下, Apo AⅠ与HDL和Apo B与LDL并非成正相关,临床上常将 Apo AⅠ和Apo B 比值作为冠心病的危险指标。 Thank You 9
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