园艺植物组织培养 植物脱毒与组培快繁技术 草莓花药培养.pptxVIP

草莓花药培养 盖上盖玻片、观察 1.花粉发育时期的检测 记录花粉处于单核期的草莓花蕾的形态特点。 2.材料的选择与处理 采集4-6mm、花萼略长于花冠或花冠刚露白、花冠白色或淡绿色且不松动，花药微黄而充实的小花蕾。用湿纱布包好，放入袋内，扎好袋口，置于冰箱中低温保存。 流水冲洗30min，70%酒精中浸泡30s后，再用2%-3%次氯酸钠浸泡10min或0.1%升汞浸泡8min，最后用无菌水漂洗3-5次。 3.花药接种 用镊子剥去部分花冠，使花药露出，夹住花丝，取出花药置于无菌滤纸上，用镊子夹住花丝，用接种环切离花药后接种于诱导培养基上。 MS +BA1.5 mg∕L +NAA0.2 mg∕L +2%蔗糖，pH值5.8 4.愈伤组织的诱导与分化 培养条件：21-25℃、2000-3000 lx、12h/d。 15-20天后产生乳黄色的愈伤组织，转移至MS +BA0.5-1.5 mg∕L的分化培养基上培养，15天后分化出半球形小凸起，后转为绿色。20天后分化出幼叶、幼茎，以后陆续分化出新梢。 5.增殖与诱导生根 培养条件：25-28℃、2000-3000lx、14h/d。 增殖：MS+BA1.5mg∕L +NAA0.2mg∕L 生根培养 生根培养 6.脱毒苗鉴定 采用小叶嫁接鉴定法鉴定草莓试管苗是否脱毒，待检草莓试管苗嫁接到指示植物上后，养护1-2个月后进行观察，如果指示植物新展开的叶片、匍匐茎或老叶上出现病症，则说明草莓脱毒失败，反之就认定已脱除病毒。 7.驯化移栽 主根长1.5cm左右，具有3片以上叶片、根白色无须根、叶大而厚、叶色深绿时，即可将瓶苗移至温室或塑料大棚，进行炼苗移栽。 温室内驯化 驯化后根系 定植于盆中