Tetramer(四聚体)技术ppt参考课件.pptVIP

Tetramer（四聚体）技术 * 原理 应用 产品 * 外源性抗原加工 递程 * * * 抗原特异性CTL的分析方法 51Cr释放实验 PCR法 ELISPOT （扩增特异T淋巴细胞受体） Tetramer 间接法、需大量的特异性CTLs作为效应细胞 需体外扩增、周期长，敏感性低。 敏感性高 但只能用于已知TCR基因型的特异性CTLs检测 迅速、灵敏、直接、特异性强、方法简单、无需刺激，目前已成为定量检测特异性 CD8+T细胞的金标准 有限稀释法(LDA) T细胞反应时敏感性、特异性和可重复性都很高，操作简单迅速，需要少量标本 * Tetramer 与ELISPOT区别？ Tetramer+的 T细胞并不能分泌细胞因子和/ 或无细胞毒活性;而某些CD8+T细胞能分泌细胞因子和/或细胞毒活性 ,却不能和tetramer结合。表明单独采用tetramer技术能精确反映机体具有高度抗原特异性的 CD8+T细胞群 ,但并不能精确反映机体的保护性免疫状态 ,必须结合相应的功能实验进行综合评估。 * 原理 应用 产品 * 1.感染性疾病： HIV-AIDS, EBV, CMV, HPV, HBV, HCV, IV, Measles, Malaria, TB and RSV 含有HIV-I型病毒包膜肽等三种抗原肽：HIV特异性CTL数量与血浆中RNA病毒量有明显的负相关，而与产毒性感染细胞的清除率无关。 慢性HCV感染患者的特异性CTLs数量明显少于急性HCV感染和已康复患者 * 2.肿瘤 Breast, Prostate, Melanoma, Colon, Lung, Cervical, Ovarian and Leukemia 用黑色素瘤抗原诱导潜在的肿瘤特异性T细胞—用Tetramer分离，富集。 * 3.移植 GVHD(移植物抗宿主反应)：受体与供体的次要组织相容性抗原(mHags)的不同引起，在骨髓移植后早期出现(14天内)，造成骨髓移植失败---HLA-mHags肽四聚体监测mHags特异性CTL，以了解对GVHD的临床治疗效果. HLA-A2/pp65 Tetramer监测肾移植患者感染CMV后的免疫应答能力. EBV and CMV * 4.自身免疫性疾病 Diabetes, Lyme disease, Multiple sclerosis, Rheumatoid arthritis, Autoimmune vitiligo *