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第四章 DNA的复制 Chapter 4 DNA Replication;第四章 DNA 复 制DNA Replication;重点内容： ①几个重要概念：DNA的复制、复制子、复制眼、复制叉、DNA聚合酶、DNA的半保留复制、DNA的半不连续复制、DNA的先导链、DNA的后随链、冈崎片段；②不同生物基因组复制子数目；③线性DNA复制末端问题的提出及解决方案；④θ-复制、滚环复制及D-环复制的机制；⑤大肠杆菌DNA聚合酶 I、II、 III 的性质比较，DNA聚合酶Ⅰ与缺口平移法制备探针；⑥DNA复制的起始、延伸及终止。 了解内容： ①基因组复制与细胞分裂的关系；②复制叉移动方向的确定；真核生物DNA聚合酶的种类及各自的功能；③DNA复制的调控。 ;1 引言---基因组复制与细胞分裂的关系 ;2 复制子(replicon);2.1 复制子的定义;质粒一般是一个自主环状的DNA基因组，构成一个独立复制子； 原核生物基因组中一般只含一个复制子，在唯一的起始点启动就会引起整个基因组复制； 真核生物基因组含多个复制子（一般40-100kb/个）。;2.3 复制眼概念 ;Replication eye;复制叉:双螺旋DNA两条亲本链分开使复制能进行的部位。;复制叉移动方向的确定;;3 DNA复制的几种形式;3.1 线性DNA双链的复制;3.1.1 线性DNA复制的具体表现; 3.1.2 线性DNA复制时末端问题的提出;复制能在新合成链的3`端结束，它如何在5`端启动呢？; 3.1.3 线性DNA复制时末端问题的解决方案;（1）通过将线性复制子转变为环状或多聚分子;The rolling circle replicates DNA;A rolling circle appears as a circular molecule with a linear tail by electron microscopy. ;Adenovirus terminal protein binds to the 5` end of DNA and provides a C-OH end to prime synthesis of a new DNA strand.;Adenovirus DNA replication is initiated separately at the two ends of the molecule and proceeds by strand displacement. ;A typical telomere has a simple repeating structure with a G-T-rich strand that extends beyond the C-A-rich strand. The G-tail is generated by a limited degradation of the C-A-rich strand.;A loop forms at the end of chromosomal DNA.;The 3 single-stranded end of the telomere (TTAGGG)n displaces the homologous repeats from duplex DNA to form a t-loop. ;Watching flash;3. 2 环状DNA的复制;3.2.1 θ-复制 replication by θ-structure;3.2.2 滚环复制 replication by rolling cycles structure;The A protein is cis-acting;3.2.3 D-环复制 Replication by displacement loop structure;D-环复制（Replication by displacement loop structure);4 DNA聚合酶;4.1 大肠杆菌DNA聚合酶的种类及其功能;性 质;（1）DNA聚合酶 I 103 kDa的单链多肽，可以被蛋白酶切成两段，C端的2/3包括聚合酶活性位点；N端的1/3包含核酸外切酶校正活性（一次可切除1-10个碱基）。 （2） 利用DNA聚合酶 I 进行缺口平移法制备探针的基本原理;Nick translation replaces part of a pre-existing strand of duplex DNA with newly synthesized material. ;4.2 真核生物DNA聚合酶的种类及其功能;真核生物由不同DNA聚合酶分别负责起