食品理化检验技术 电位滴定法测定氨基酸态氮的含量 电位滴定法测定氨基酸态氮的含量.pptxVIP

蛋白质和氨基酸的测定主讲：李静 曹淼蛋白质基础知识一二蛋白质的测定方法氨基酸基础知识氨基酸的测定方法三四氨基酸的测定—电位滴定法目的与要求原理试剂与器材操作要点结果分析注意事项思考与讨论一、目的与要求氨基酸的测定—电位滴定法氨基酸态氮含量测定的目的与要求学习电位滴定法测定农产品中氨基酸总量的基本原理和操作方法；掌握pH计的使用方法和滴定基本操作。二、原理氨基酸的测定—电位滴定法酱油中总氨基酸态氮含量测定的原理根据氨基酸的两性作用，加入甲醛以固定氨基的碱性，使羧基显示出酸性，将酸度计的玻璃电极及甘汞电极同时插入被测液中构成电池，用NaOH标液滴定，依据酸度计指示的pH值判断终点。12主要器材：酸度计、磁力搅拌器、碱式滴定管、铁架台、蝶形夹、锥形瓶等。材料：酱油试剂：40%中性甲醛溶液、0.05mol/L的NaOH标准溶液。三、器材与试剂氨基酸的测定—电位滴定法四、操作要点氨基酸的测定—电位滴定法取样（吸取5ml酱油，加水定容至100ml，取20ml）于烧杯中加60ml蒸馏水，开动磁力搅拌器，0.05mol/L NaOH标液滴定至pH8.2加10ml甲醛，混匀，0.05mol/L NaOH标液滴定至pH9.2，记录消耗体积同时取水80ml，做试剂空白试验记录NaOH溶液的消耗体积五、结果与分析氨基酸的测定—电位滴定法1. 数据记录表1 数据记录表项目第一次第二次第三次平均值样液加入甲醛后滴定至pH 9.2消耗NaOH 体积（mL）???空白液加入甲醛后滴定至pH 9.2消耗NaOH 体积（mL）???五、结果与分析氨基酸的测定—电位滴定法2. 结果计算X——样品中氨基酸态氮的含量，g/100mL；V1——空白试验加入甲醛滴定至终点（pH9.2）消耗NaOH标准溶液的体积，mL；V2——测定样品在加入甲醛后滴定至终点（pH9.2）所消耗NaOH标准溶液的体积，ml；C——NaOH标准滴定溶液的浓度，mol/L；0.014——1mL 1.000mol/L的NaOH标准滴定液相当于氮的质量，g；V——样品的体积，mL；V3——样品稀释液的总体积，mL；V4——样品稀释液的取用量，mL。六、注意事项氨基酸的测定—电位滴定法电位滴定法测定氨基酸态氮时需要说明的问题及注意事项如下：1、标准pH缓冲液按规定配制好后为避免其pH值发生变化，存放时间不应过长，否则将直接影响滴定终点，导致检测结果不准确；2、久置的复合电极初次使用时，要先在饱和KCl溶液中浸泡24h以上；3、本法准确快速，可用于各类样品游离氨基酸含量测定；4、对于浑浊和色深样液可不经处理而直接测定。七、思考与讨论氨基酸的测定—电位滴定法1．检测时为什么要加入甲醛？2．根据实训结果，探讨产生实训误差的原因。 谢谢