02第二章 灭活疫苗最终版.ppt

病原体的选择 ④在培养过程中不产生或产生较小的毒性; ⑤制备类毒素的菌种：在培养过程中能产生大量的典型毒素; ⑥要针对不同的病原血清型选择符合当地流行的菌、毒株，以保证所制造的疫苗具有良好的免疫效果 优选文档 * 灭活方法的选择 灭活方法的选择关系到疫苗质量的好坏 灭活剂（关键） 灭活条件 灭活时间 既要考虑其对疫苗抗原性的破坏作用，同时又要避免其对毒素的脱毒后又发生毒性逆转现象。 优选文档 * 细菌性灭活疫苗和类毒素的制备工艺 优选文档 * 福尔马林对外毒素脱毒的影响因素 研究证明: 很低浓度的福尔马林即能使外毒素完全脱毒并能保持其良好的免疫原性，表明福尔马林是一个较为理想的脱毒剂。 福尔马林的脱毒作用较为复杂，在使用时要特别注意影响福尔马林脱毒的四个因素 优选文档 * 福尔马林对外毒素脱毒的影响因素 温度 pH 福尔马林浓度 毒素种类 这四者相互联系、相互影响，改变其中任何一个因素都会产生不同的结果，故在制备疫苗时要综合考虑，选择最佳的脱毒条件。 优选文档 * 福尔马林对外毒素脱毒的影响因素 ①温度 在其他因素固定的条件下 温度越高，脱毒越快 脱毒温度↓ 类毒化时间就会延长 如需加快作用时间：必须提高福尔马林浓度和pH。 优选文档 * 福尔马林对外毒素脱毒的影响因素 ①温度-----视具体的疫苗种类而定 一般脱毒温度：37 ℃ -39 ℃ 脱毒温度≥40℃ 破坏外毒素的抗原性 产生外毒素的菌种： 在较低温度下脱毒效果更好 优选文档 * 福尔马林对外毒素脱毒的影响因素 ②微酸条件下（pH6.3） 脱毒时间很慢，需要较高的福尔马林浓度 如福尔马林浓度较高，脱毒完成后会剩余较多的游离福尔马林，使类毒素的脱毒过甚，损害了类毒素效力的稳定性。 优选文档 * 福尔马林对外毒素脱毒的影响因素 ②碱性条件下 脱毒快，可用较低的福尔马林浓度。 pH= 7.2~8.6，福尔马林浓度的使用和pH成反比。 在强碱性溶液中脱毒，类毒素的抗原性损失会加大。 因此，外毒素脱毒时pH很重要，通常以微碱性为最好。 优选文档 * 福尔马林对外毒素脱毒的影响因素 ③福尔马林浓度 福尔马林浓度∝脱毒速率 浓度越高， 脱毒时间越快，其抗原性的损失也越大。 优选文档 * 福尔马林对外毒素脱毒的影响因素 ④毒素的种类 不同种类外毒素分子量和分子结构不一，不同菌株要使用不同培养基 不同的外毒素中均含有不同种类及不同浓度的含氮物质，如蛋白质、肽类和氨基酸等，这些化合物都能与福尔马林起作用。 所以，不同外毒素在脱毒时所使用的温度、pH和福尔马林浓度是不一样的 优选文档 * 二、病毒性灭活疫苗的设计及制备要求 ?病毒病原体自身的结构组成和生物学活性较为简单，在考虑制备灭活疫苗时，一般将全部病毒颗粒用来作为疫苗抗原，以寻求其最佳的保护效果。 优选文档 * 病毒性灭活疫苗的优点 ①制备工艺较为成熟，免疫原的稳定性高，培养的病毒含量达到要求滴度即可进行大量生产，较易制备多价疫苗; ②由于不存在活病毒颗粒，没有感染问题，安全性好; ③保存方便，一般无需冻干保存。 优选文档 * 病毒性灭活疫苗的缺点 ①制备疫苗的毒株为强毒株，如在制备过程中灭活不彻底，极易酿成重大事故; ②由于所诱导的免疫反应持续时间较短，需多次进行免疫接种，可能引起过敏反应; ③由于需要的抗原量大、质纯，因此要求对疫苗进行浓缩和纯化； 优选文档 * 病毒性灭活疫苗的缺点 ④由于灭活疫苗接种不是通过自然感染途径，一般不能诱生局部IgA免疫抗体，使外来病毒仍可侵入门户，并在局部繁殖，保护效果不甚满意; 5 由于灭活剂对病毒的抗原性有一定影响，灭活疫苗需要添加佐剂。 优选文档 * （1）脊髓灰质炎灭活疫苗的制备 猴肾细胞、人二倍体细胞或Vero细胞 病毒 病毒悬液 灭活 37°C， pH7.0， 福尔马林（1 : 4 000） 脊髓灰质炎灭活疫苗 12--15天 皮下注射三次接种 优选文档 * （2）甲型肝炎 甲型肝炎病毒(hepatitis A virus， HA V)引起的急性传染病，主要通过粪-口途径传播。 病毒的体外培养 原代恒河猴肝细胞 传代恒河猴胚肾细胞株(FRhK6) HAV灭活疫苗 Havrix（美国SmithKline公司） Vaqta （美国Merck公司） AVAXIM（法国巴斯德血清和疫苗研究所） 1979年，Provost和Hilleman 优选文档 * （3）流行性乙型脑炎 夏秋季，经蚊子叮咬传播，是人畜共患的中枢神经系统传染病。 1954年，灭活疫苗在日本问世（中山株/鼠脑） 1968年，中国从开始生产（ P3株/原代仓鼠肾细胞） 1988年，WHO颁布了生产规程。 优选文档 * （4）流感 由流感病毒引起的，具有高度传染性的急性呼吸道传染病 流行病学特点: