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TCS 65.\50 B 5\ DB37 东 也 ETJ 省 方 标 准 山 DB37/T 420.2-2004 海水养殖鱼类指状拟舟虫病诊断规程 第二部分:扫描电镜诊断法 2004-12-14 发布 2005-01-01 实施 山东省质量技术监督局发布 DB37/T 420.2-2004 ~ 目IJ E司 本标准由山东省海洋与渔业厅提出。 本标准由山东省渔业标准化专业技术委员会归口o 本标准起草单位:山东省海水养殖研究所。 本标准起草人:李天保、 H十淘♂ 斌、刘恩孚、朱安成、吴志宏。 DB37/T 420.2-2004 海水养殖鱼类指状拟舟虫病诊断规程 第二部分:扫描电镜诊断法 1 范围 本标准规定了指状拟舟虫病扫描电镜诊断所需试剂与材料、操作步骤和结果判定。 本标准适用于海水养殖鱼类,包括牙僻、大菱僻、真铜等养殖鱼类品种,感染指状拟舟虫情况的筛 选和诊断。 2 规范性引用文件 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件,其随后所有的 修改单(不包括勘误的内容)豆豆修订版均不适用于本标准,然而,鼓励根据本标准达成协议的各方研究 是再叫使用这些文件的必威体育精装版版本。凡是不注日期的引用文件,其必威体育精装版版本适用于本标准。 GB !T6682-92 分析实骑车用水规格和实验方法》。 3 指状拟冉虫病的病理学特性 指状拟舟虫是海水鱼类养殖过程巾引发奇生虫疾州的主要奇生虫之伞。感染指状拟舟虫可导致鱼类 肌肉组织及脑组织严重病变、坏死,井大量奇牛于循环系统中吞噬血细胞,导致贫血。感染初期,在鱼 的体表以及口腔粘膜等处发牛歧烂,严重时侵入鱼体内,常继发感染致惰性细菌导致鱼类死亡率增高。 4 试剂和材料 若非注明,本标准使用确认为分析纯的试剂。 所用水若非注明所符合GB!T6682-92规定O NaÆP0 • 2H 0 。 4 2 NaH P0 • 2H 0 。 2 4 2 戊二醉。 30%乙醇。 50%乙醉。 70%乙醉。 80%乙醉。 90%乙醇。 无水马醉。 过滤海水:盐度为20~30的海水在室内放青一周后,经滤纸和O. 22μm滤膜u滤。 磷酸盐缓冲液t去附录A的规定。 磷酸缓冲戊二醒按附录A的主!M5:E o 5 检验步骤 用u滤海水清洗病鱼损烂组织,收集清洗液,离心 C2000r/min, 5mi日) ,用过滤海水反复洗涤沉 淀物。将洗涤后的沉淀物放入用磷酸盐缓冲液(0. 1mo l/L, pH7. 2) 配制的1%戊~.~辛中固定20min~30min, 固定时所不时摇i)J , 使材料均匀分布在固定液中。低速i勾心 Cl 500r/min) 去掉上洁液,用缓冲液洗涤 沉淀物数次。
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