毒理学实验PPT参考课件.pptVIP

5、试验报告 试验报告应以表格形式总结，包括如下内容： 受试物名称、理化性状、配制方法和用量。必要时说明pH值 实验动物种属、品系、性别、体重和来源(合格证号和级别) 实验动物饲养环境：饲料来源、室温、相对湿度、动物房合格证号 每个动物在每一观察时点的皮肤刺激反应积分 具体描述除刺激性以外的其它毒性作用 结论 * * 8 试验结果的解释 急性皮肤刺激试验结果从动物外推到人的可靠性很有限。 白色家兔和豚鼠在大多数情况下对有刺激性或腐蚀性的物质较人类敏感。 若用其它品系动物进行试验时也得到类似结果，则会增加从动物外推到人的可靠性。 试验中使用封闭式接触是一种超常的实验室条件下的试验，在人类实际接触化学品过程中很少存在这种接触方式。 * 附：多次皮肤刺激性试验步骤 1 试验前将实验动物背部脊柱两侧被毛剪掉，去毛范围各为2cm×3cm，涂抹面积2.5 cm×2.5cm。 2 取受试物约0.5mL(g)涂抹在一侧皮肤上，当受试物使用无刺激性溶剂配制时，另一侧涂溶剂作为对照，每天涂抹1次，连续涂抹14d。从第二天开始，每次涂抹前应剪毛，用水或无刺激性溶剂清除残留受试物。一小时后观察结果，按表1 评分，对照区和试验区同样处理。 * 结果评价：按下列公式计算每天每只动物平均积分，以表2判定皮肤刺激强度。 * * DDV：LD50：50～80 mg/kg(大鼠经口)；75-107，113 mg/kg(大鼠经皮)；LC50：15mg/ (大鼠吸入，4h) 二甲苯：LD50：5000mg/kg（大鼠经口）；LC50：1947mg/m3（大鼠吸入）;轻微粘膜刺激。引起皮肤发红。家兔经皮：500mg/24h，中度刺激 甲醛：急性毒性：LD50800mg/kg（大鼠经口），2700mg/kg（兔经皮）；LC50590mg/m3（大鼠吸入）；人吸入60～120mg/m3，发生支气管炎、肺部严重损害；人吸入12～24mg/m3，，鼻、咽粘膜严重灼务、流泪、咳嗽；人经口10～20ml，致死。 * 实验三小鼠骨髓细胞微核试验 * 一、目的：掌握小鼠骨髓PCE微核测定方法 二、原理 染色体断裂?染色体完整性 纺锤丝受影响?染色体分离改变 有核细胞：难与核的分叶鉴别 红细胞：最后一次分裂后将主核排出（PCE） PCE 24小时NCE（比PCE小1/5） 灰蓝色 桔红色 * * 三、材料、试剂 试剂：受试物、阳性物、小牛血清、染液等 动物 器材 * 四、步骤 动物选择：雌雄各半 剂量选择： 阴性、阳性对照，3-5个剂量组 高、中、低剂量组： 1/5、1/10、1/20 LD50 最高剂量组： 动物分组、编号、标记 动物染毒：环磷酰胺（阳性对照实验）腹腔注射，20mg/kg，每组2只鼠 染毒次数：两次或多次染毒，每天染一次 * 涂片、固定、染色： 脱臼处死?胸骨或股骨（股骨连接骨盆和小腿骨，取股骨保留股骨头和膝盖骨）?肌肉软组织用纱布包上去除?剪掉两端，移液枪吸血清（预热）1ml放离心管中?1ml注射器吸血清，镊子夹股骨冲洗骨髓细胞，1端冲洗3-5次，2端共冲洗6-10次?1000rpm离心10min?倒掉上清，留0.2-0.3ml上清?推片?晾干甲醇固定30-60s?吉姆萨染色10min * 吉姆萨工作液：蒸馏水=1:9 染色缸50ml 染色后冲洗无细胞的一侧，显微镜观察PCE 镜检计数：PCE/NCE 200个 PCE微核率 1000个 * 五、结果、统计分析与结论 阴性？ 阳性？ * 急性眼刺激试验 实验目的：掌握急性眼刺激试验原理、设计的基本方法、内容及思路，操作方法，了解刺激强度判断标准，结果判定。 实验原理：用于评价受试物对哺乳动物眼睛是否有刺激作用或腐蚀作用及其程度。将受试物滴入或涂入动物一侧眼结膜囊内，另一侧用赋形剂作为对照。在停止接触后的不同时间观察角膜、虹膜及结膜的反应情况，根据评分标准判断受试物对眼刺激的强度。 * （1）选择家兔，称重、编号，检查动物双眼，有无异常。3-4只/组（我们1只/组） （2）染毒：采用同体自身对照，轻轻拉开实验动物一侧眼睛的下眼睑，将配好的药物0.1ml滴入或涂入一侧眼结膜囊内，另一侧用赋形剂作为对照，给药后使眼睛被动闭合一段时间后，用生理盐水冲洗（规定84消毒液被动闭合时间为4s，30s后进行冲洗，1h后观察；农药被动闭合时间为1min，24h不做冲洗，1h后观察） * （3）刺激反应观察：1h、24h、48h、72h，肉眼观察家兔眼角膜、虹膜及结膜的损伤情况。如72h内未出现刺激反应，即可终止试验。若有刺激反应发生，要继续观察损伤的经过及其