3[1].2体外受精和早期胚胎培养.pptVIP

知 识 回 顾 受精阶段 卵子成熟 早期胚胎发育 减数分裂 罗伯特·爱德华兹获2010诺贝尔生理医学奖 “代孕” 专题3 胚胎工程 3.2 体外受精和早期胚胎培养 试管动物技术 通过人工操作使卵子和精子在体外条件下成熟和受精，并通过培养发育为早期胚胎后，再移植产生后代。 概念 生殖方式 有性生殖 + 胚胎培养 技术基础 体外受精 其中包含哪几个关键步骤？ 1、卵母细胞的采集和培养 2、精子的采集和获能 3、体外受精 胚胎培养 4、胚胎的早期培养 1、卵母细胞的采集 （1）几种采集方法 （3）采集部位 （4）具体操作过程 （5）得到的卵子可否可以直接受精 （2）适用动物 2、体外获能 （3）使用的培养液 （1）几种获能方法 （2）适用动物 2、卵母细胞的培养 （1）培养到哪个时期 1、精子的采集 （1）几种采集方法 （2）具体操作过程 体外受精 （1）受精的环境 （2）受精的要求 胚胎的早期培养 （1）培养的目的 （2）培养液的成分 （3）培养后的早期胚胎的处理方式 （4）不同动物进行移植的时间是否相同 （3）精液为什么要进行离心处理 一 组 二 组 三 组 四 组 采集 方法 采集 部位 适宜 动物 操作 卵子可否直接受精 卵母细胞的采集 超数 排卵法 卵巢 取卵 法 输卵管 卵巢 小鼠、 兔、猪、羊 大家畜 或大型 动物， 如牛 用促性腺激素处理， 使其排出更多的卵子， 然后从输卵管中冲取 卵子 ①已屠宰母畜的 卵巢中采集卵母细胞 ②借助工具，直接从 活体动物的卵巢中吸 取卵母细胞 采集的卵子 可直接参与 体外受精 采集的卵母细 胞，要体外人 工培养成熟后， 才能参与受精 精 子 的 采 集 采集方法 适宜动物 操作 手握法 电刺激法 体型小，易控制的家畜，如，猪、犬 野生动物或经济动物 麻醉动物，用特制电极伸入动物直肠，直接刺激射精中枢神经(腰骶部) 无需设备，徒手或戴上橡胶手套，直接把握雄性动物的阴茎，给予适当的压力和刺激 采用仿生学方法，模仿发情雌性动物阴道环境，满足雄性动物交配时对压力、温度和润滑度的要求，同时配有活台畜或假台畜 体型较大的家畜 假阴 道法 获能方法 适宜动物 培养液 啮齿类动物、家兔和猪等 人工配制的获能液 牛、羊等家畜 一定浓度的肝素或钙离子载体中 精 子 的 获 能 培养法 化学诱导法 获能溶液或 专用的受精溶液 精子和卵子一般要放在培养液小滴内共同培养一段时间才能完成受精 受 精 环境 要求 受 精 新鲜或 解冻精液 分离精子和精液 培养法 化学诱导法 获能液/专用受精溶液 体 外 受 精 哺乳动物的卵子和精子在体外人工控制的环境中完成受精过程的技术 概念 基本原理 人工模拟体内环境，（营养物质、PH、温度等）使卵母细胞成熟、精子获能，最终完成受精 受精卵移入发育培养液中继续培养，以检查受精状况和受精卵的发育能力 × ？ 受精卵应移入发育培养液中继续培养，以检查受精状况和受精卵的发育能力 培养液成分 维生素、激素、氨基酸、核苷酸等 血清 胚胎后期操作 向受体移植 / 冷冻保存 培养条件 1、无菌 2、适宜的温度和PH值 3、营养物质和激素 动物 胚胎移植时间 胚胎的早期培养 胚胎移植的时间不同 牛、羊等 小鼠、家兔等实验动物 人 桑椹胚或囊胚阶段 桑椹胚或囊胚前阶段 8－16个细胞阶段 3万～5万 1、价格昂贵，资金的限制 2、牛生育力低，一生只能生育4-5头 体外受精和早期胚胎培养技术的应用 快速繁殖优良品种 试管牛工厂化生产 采集良种母牛的卵母细胞 卵母细胞的体外培养 采集良种公牛精子 精子体外获能 体外受精 良种牛体外受精胚胎 胚胎移植 受体牛 良种犊牛 成熟期牛 屠宰加工厂 市场 采集卵巢中的卵母细胞 “试管牛”工厂化生产的技术流程图 试管动物技术 通过人工操作使卵子和精子在体外条件下成熟和受精，并通过培养发育为早期胚胎后，再移植产生后代。 概念 生殖方式 有性生殖 + 胚胎培养 技术基础 体外受精 工业化生产意义 实现优良家畜的快速繁殖 总结： 试管动物 与 克隆动物相比 生殖方式： 技术手段： 遗传规律： 有性生殖 无性生殖 核移植技术、 胚胎移植 遵循 无 体外受精 胚胎移植 及 时 巩 固 1、下列关于体外受精和早期胚胎培养的说法错误的是（ ） A、在体外受精前，要对精子进行获能处理 B、精子和卵子一般要放在培养液小滴内共同培养一段时间才能完成受精作用 C、受精卵在受精溶液中进行早期发育 D、胚胎发育到适当阶段可进行冷冻保存 C 受精溶液 区分： 获