SN／T 1311-2003_马尔堡病检测方法.pdfVIP

中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 ／ — 犛犖犜１３１１ ２００３ 马 尔 堡 病 检 测 方 法 犘狉狅狋狅犮狅犾狅犳犱犲狋犲犮狋犻狀 犿犲狋犺狅犱狊犳狅狉犿犪狉犫狌狉 犱犻狊犲犪狊犲 犵 犵 ㅤㅤㅤㅤ ２００３０８１８发布 ２００４０２０１实施 中 华 人 民 共 和 国 发 布 国家质量监督检验检疫总局 ／ — 犛犖犜１３１１ ２００３ 马 尔 堡 病 检 测 方 法 １ 范围 　 本标准规定了马尔堡病检测方法。 本标准适用于马尔堡病抗体水平的检测。 ２ 缩略语 　 下列缩略语适用于本标准。 ２．１ ＥＬＩＳＡ 酶联免疫吸附试验。 　 ２．２ ＩＦ 免疫荧光试验。 　 ２．３ ＭＢＧ 马尔堡病。 　 ２．４ ＰＢＳ 磷酸盐缓冲液。 　 ２．５ ㅤㅤㅤㅤ ＴＣＩＤ 半数细胞感染量。 　 ５０ ２．６ ＣＰＥ 细胞病变效应。 　 ２．７ ＯＤ值 光密度值。 　 ３ 原理 　 ３．１ 犐犉试验 　 将感染 ＭＢＧ病毒的细胞固定在带圈的载玻片上，在特异性抗体存在时，利用抗原抗体反应具有高 度特异性这一特点，再加上荧光色素标记的二抗，与结合在抗原上的抗体结合，在荧光显微镜下呈现一 种特异性荧光反应。 ３．２ 犈犔犐犛犃试验 　 将抗原包被在酶标板上，在特异性抗体存在时，抗原抗体结合，再加入酶标二抗，形成抗原抗体酶标 二抗复合物。复合物中的酶在遇到相应的底物时，催化底物分解，产生有色物质。根据有色物质的有无 及其浓度，间接推测抗体是否存在以及其效价。 ４ 试剂和材料 　 试剂和材料的准备如下： ———ＭＢＧ病毒：由指定单位提供； ———包被用重组核蛋白抗原：由指定单位提供； ———阴、阳性血清：由指定单位提供； ———细胞抗原片：由指定单位提供或自制； １ ／ — 犛犖犜１３１１ ２００３ ———被检血清：用真空管采集血液，无菌分离血清， 保存。用前 灭活 ； －２０℃ ６０℃ １ｈ ———酶标二抗：由指定单位提供； ———底物溶液：由指定单位提供； ———荧光素标记二抗：由指定单位提供； ———细胞： 细胞； Ｖｅｒｏ ———细胞营养液、维持液、细胞分散液、包被液、洗涤液、稀释液、终止液、 的配制见附录 。 ＰＢＳ Ａ