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2.2 动物细胞工程;考纲 考情;考情 播报;【知识梳理】 一、动物细胞培养 1.操作流程: 组织 单个细胞的悬浮液 _____培养 _____培养;2.培养条件: (1)无菌、无毒的环境:对_______和所有培养用具进行无菌处理, 添加_______,定期更换培养液以_____________。 (2)营养:除正常的有机和无机营养外,加入___________等一些 天然成分。 (3)适宜的温度和pH:温度为____________(哺乳动物),pH为 _________。 (4)气体环境:含95%空气加_____的混合气体,其中后者的作用是 _______________。 3.应用:生物制品的生产,检测_________,医学研究。;二、动物体细胞核移植技术和克隆动物 1.动物核移植:将动物一个细胞的_______移入一个已经去掉细胞 核的_________中,使其重组并发育成一个新的胚胎,这个新的胚 胎最终发育为_________。;2.过程: 3.原理:动物体细胞核具有_______。 4.结果:获得与供体_________基本相同的个体。 5.克隆动物:用核移植方法得到的动物。;三、动物细胞融合 1.原理:_______________。 2.融合方法:聚乙二醇(PEG)、___________、电激等。 3.意义:突破了_____________的局限,使_________成为可能, 也为制造___________开辟了新途径。;四、单克隆抗体 1.制备过程:;2.优点:特异性强、_________,并可大量制备。 3.用途:作为_________,用于治疗疾病和_________。;【速记卡片】 1.动物细胞培养过程: (1)分散细胞方法:组织块剪碎,用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理。 (2)生长特点:贴壁生长、接触抑制。 (3)分瓶。 (4)原代培养:动物组织消化后的初次培养。 (5)传代培养:分瓶继续培养。;2.动物细胞培养的条件: (1)无菌、无毒的环境。 (2)营养:糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素、动物血清、血浆等。 (3)温度和pH:与动物体温相近,pH为7.2~7.4。 (4)气体环境:CO2的主要作用是维持培养液的pH。 3.动物细胞融合: (1)原理:细胞膜的流动性。 (2)融合方法:聚乙二醇(PEG)、灭活的病毒、电激等。;4.单克隆抗体制备: (1)涉及的三种细胞作用不同。 B淋巴细胞:能分泌单一抗体,但不能无限增殖。 骨髓瘤细胞:能大量增殖,但不能产生抗体。 杂交瘤细胞:既能产生单一抗体,又能大量增殖。 (2)两次筛选的目的不同。 第一次筛选是得到杂交瘤细胞。 第二次筛选是得到能分泌所需抗体的杂交瘤细胞。;考点一 植物组织培养、动物细胞培养和细胞核移植 1.三者比较:;项目;2.动物细胞核移植的疑难解析: (1)卵母细胞选择时期及原因:MⅡ中期的卵母细胞,此时具备受精能力,细胞质中合成与分裂、分化有关的物质能刺激融合后重组细胞进行分裂分化,形成重组胚胎。 (2)选卵细胞作为受体细胞的原因。 ①卵细胞大,易于操作。 ②卵黄多,营养丰富,为发育提供充足的营养。 ③能激发重组细胞分裂分化。;(3)供体细胞:取供体动物的体细胞培养,一般选用传代10代以内的细胞,因为10代以内的细胞一般能保持正常的二倍体核型,保证了供体细胞正常的遗传基础。 (4)动物体细胞不能经培养直接发育成完整个体的原因:动物体细胞的全能性受到限制。 (5)该过程用到的技术手段:动物细胞培养、动物细胞融合、早期胚胎培养和胚胎移植。;【高考警示】动物细胞培养和核移植技术的理解误区 (1)动物细胞培养中两次使用胰蛋白酶的作用不同:第一次用胰蛋白酶处理剪碎的组织使之分散成单个细胞,第二次使贴壁细胞从瓶壁上脱落下来。 (2)核移植产生的克隆动物与提供细胞核的亲本可能不同。 ①克隆动物细胞质基因来源于另一个亲本,与植物组织培养不同(来自一个亲本),即克隆动物遗传物质来自两个亲本。 ②在发育过程中可能发生基因突变、染色体变异导致性状改变。 ③外界环境条件的影响引起不可遗传的变异。;【考题回访】 1.(2015·银川模拟)回答下列有关动物细胞培养的问题: (1)在动物细胞培养过程中,当贴壁细胞分裂生长到细胞表面______ 时,细胞会停止分裂增殖,这种现象称为细胞的 。 此时,瓶壁上形成的细胞层数是 。要使贴壁的细胞从瓶壁上 分离下来,需要用酶处理,常用的酶是 。;(2)随着细胞传代次数的增多,绝大部分细胞分裂停止,进而出现 的现象;但极少数细胞可以连续增殖,其中有 些细胞会因遗传物质发生改变而变成 细胞,这种细胞 的黏着性 ,细胞膜表面蛋白
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