人骨肉瘤细胞特异性结合肽的筛选及验证-南方医科大学学报.pdf

2012;32(5) 南方医科大学学报（J South Med Univ ） ·647 · 基础研究 人骨肉瘤细胞特异性结合肽的筛选及验证 1 2 1 1 1 1 1 卢 坤 ，姜 勇 ，管明强 ，肖 军 ，王 健 ，李郅涵 ，史占军 1 2 南方医科大学 南方医院关节与骨病外科，病理生理教研室，广东 广州 510515 摘要：目的获得人骨肉瘤细胞MG63 特异性结合肽，为骨肉瘤靶向治疗奠定基础。方法 应用噬菌体展示技术，以人骨肉瘤细 胞作为靶细胞，293T 细胞为差减细胞，筛选获得MG-63 细胞特异性结合肽。酶联免疫法进行靶向性验证。应用荧光染色技术 初步探讨短肽细胞受体位置。制作人骨肉瘤模型，尾静脉注射目标噬菌体，免疫组化检测其靶向性。结果 经过四轮一步有机 相离心分离方法，获得了与骨肉瘤细胞特异性结合的短肽，并测序获得其中出现次数最多的序列SLTNLSK，靶向验证结果显示 该短肽有较强的特异性。结论 应用噬菌体展示技术，获得了与人骨肉瘤细胞特异性结合的短肽，序列为SLTNLSK，并验证了 其靶向性。可以作为骨肉瘤靶向治疗的导向性化合物。 关键词：骨肉瘤；靶向治疗；噬菌体展示技术；结合肽 中图分类号：R34; R738.1 文献标志码：A 文章编号：1673-4254（2012）05-0647-04 doi: 10.3969/j.issn. 1673-4254.2012.05.013 /kcms/detail/44.1627.R1622.012.html Screening and identification of peptides specifically binding to human osteosarcoma cells 1 2 1 1 1 1 1 LU Kun , JIANG Yong , GUAN Mingqiang , XIAO Jun , WANG Jian , LI Zhihan , SHI Zhanjun 1 2 Department of Orthopedics, Nanfang Hospital , Department of Pathophysiology , Southern Medical University, Guangzhou 510515, China Abstract: Objective To obtain the peptide that specifically binds to human osteosarcoma MG-63 cells from Ph. D. 7TM phage display peptide library. Methods Human osteosarcoma MG-63 cells were used as the target cells with human embryonic kidney 293T cells as the control for screening the peptide from Ph. D. 7TM phage display peptide library. The enriched specially binding peptides were verified by cell enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). The location of the peptide in MG-63 cells was investigated using cell fluorescence staining, and targeting of the peptide