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医学检验本班《分子生物学检验技术》试卷
选择题(在备选答案中选择一个最佳答案,每题2分,共20分):
1. 在核酸提取时,常需要使用氯化钠,醋酸钠等盐溶液,真正的目的是( )
A. 中和核酸的负离子,使其易于沉淀 B. 调节PH值
C. 保持核算的完整性 D. 提高核酸的浓度
E. 无特定目的
2. 在一个DNA分子中,如G所占摩尔比为17.2%,则A所占摩尔比为( )
A. 82.8% B. 32.8% C. 17.2% D. 65.6% E. 无法计算
3.下列那项不是扩增反应所必需的?( )
A. 引物和模板 B. dNTP C. Mg++ D .DNase E. 缓冲液
4. 下列那项是分子生物学技术形成的理论基础?( )
A. 基因结构与功能的关系 B. 基因结构变异与疾病的关系
C. 病原微生物的基因结构特征 D. 基因的表达.调控与疾病的关系
E. 以上皆是
5. 分子生物学检验技术主要包括那些技术?( )
A. 核酸分子杂交技术 B. DNA测序技术
C. PCR技术 D. DNA重组技术
E. 以上全是
6. 下列哪项检测需应用分子生物学检验技术?( )
A. 肝功能检测 B.乙肝两对半检测
C. 乙肝病毒DNA(HBV-DNA)检测 D. 肿瘤细胞培养
E. 病原微生物培养
7. 在核酸的分离纯化过程中,为保证其一级结构的完整性,应采取( )
A. 尽量简化分离步骤,缩短提取时间 B. 适当延长提取时间
C. 在37摄氏度条件下进行 D. 加入Mg++,Ca++等二价金属离子
E. 以上全是
8. 有一核酸样品,测得A260/A280=2.0,请问该样品属于哪类核酸样品?( )
A. DNA B. RNA
C. 是DNA,但有蛋白质污染 D. 是RNA,但有蛋白质污染
E. DNA和RNA
9. 在RNA提取和纯化过程中,为避免Rnase污染而导致RNA的降解,应采取( )
A. 在洁净的实验室里操作 B. 带手套和口罩
C. 所用器材高压消毒或DEPC处理 D. 冰浴下操作
E. 以上皆是
10. 随机引物标记法全程标记DNA时,需选用下列哪种酶?( )
A. DNA多聚酶I的Kelnow片段 B. TaqDNA聚合酶
C. 限制性内切酶 D. DNA连接酶
E. 末端转移酶
判断题:(你认为下列叙述正确的请在题后括号内打√,错误的打×,每题2分,共6分)
1. 双脱氧核酸链终止法是最常用的DNA测序技术( )
2. TapDNA聚合酶的作用是催化DNA合成,但由于缺乏3’→5
3. 采用加热煮沸法可使RNase完全失活( )
三:填空题(每空格2分,共24分):
1. 在选择核酸的分离纯化方法,应遵循的总原则是:一是保证核酸(一级结构的完整性);二是尽可能(排除其他分子的污染,保证核酸样品的纯度 )。
2. 在PCR反应中,Mg++是个至关重要的因素,浓度( 过低 )会降低酶的活性,浓度( 过高 )又会导致非特异性扩增。
3. 用于核酸杂交的普通硝酸纤维素膜最大的优点是(本底低 ),因而最容易检测杂交信号,缺点是( 脆性大 )易破裂,且队<500bp的核酸结合力低。
4. 整个核酸杂交反应主要由(预杂交)、(杂交)和(洗脱)三个步骤组成。
5. 转移到硝酸纤维素膜或尼龙膜上的核酸,其与滤膜的结合是松散的,需做进一步的固定,常用的固定方法是(烘烤)、(紫外线固定)和(碱固定)。
名词解释:(每题4分,共20分):
1. 融点曲线分析技术:是根据野生型序列和突变序列因不同Tm而产生不同的融点曲线而设计的。
2. 探针:指所有能与特定的靶分子发生特异性的相互作用,并可以被检测的分子。
3. Tm值: DNA熔解温度,指把DNA的双螺旋结构降解一半时的温度。
4. 转染:将外源DNA直接导入真核生物细胞的过程称为转染。
5. 转化:将重组的DNA分子导入细菌,使其在细菌体内扩增及表达的过程称为转化。
问答题:(每题10分,共30分)
1. 简述限制性内切酶
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