台州市区生物选考研讨会资料生物基因工程.pptVIP

课堂练习 （2分）下列关于DNA连接酶的说法，正确的有 ①利用DNA连接酶即可将目的基因和质粒连接成重组质粒 ②DNA连接酶发挥作用需要模板 ③DNA连接酶可催化任意核酸片段的连接 ④DNA连接酶催化碱基互补配对，从而可使DNA片段相连 ⑤DNA连接酶也可催化DNA片段和单个脱氧核苷酸连接 A.0项 B.1项 C.2项 D.3项 你的答案是： Ti质粒：是存在于农杆菌细胞中的质粒。其上的T-DNA区段可在农杆菌侵染植物细胞时从Ti 质粒上切割下来、转移至植物细胞中并能插入植物细胞的染色体DNA上。 T-DNA T-DNA T-DNA KanR：卡那霉素抗性基因 SpcR：壮观霉素抗性基因 T-DNA T-DNA T-DNA 改造后的Ti质粒 改造后的Ti质粒 请你说一说培育转基因蓝色玫瑰时应如何构建重组质粒（2分）？ 第二环节：构建重组DNA 2016年5月15日17点 2016年5月15日22点 2016年5月16日12点 白玫瑰 含蓝色食用色素的水 蓝色妖姬（花语是清纯的爱和敦厚善良) 蓝色妖姬：等白玫瑰快到成熟期时，将其切下来放进盛有着色剂的容器里，将着色剂吸入后进行染色。 若想培育可遗传的蓝色玫瑰，你有何设想？ 基因工程（第一课时） 浙江省黄岩中学 刘海珠 三色堇 白玫瑰 借助于基因工程的技术手段，利用三色堇和白玫瑰培育可遗传的蓝色玫瑰 目的基因：三色堇中的蓝色色素基因。 受体细胞（宿主细胞）：白色玫瑰的细胞。 第一环节：获取目的基因 三色堇 目的基因序列已知（1分）： 目的基因序列未知（1分）： 化学合成法；PCR法 构建基因文库 什么是化学合成法 利用DNA自动合成仪按照序列要求直接将脱氧核苷酸连接，最终生成目的基因，是一种从无到有的合成过程，合成过程无需模板。 DNA合成仪 什么是PCR技术 在PCR管中加入DNA模板、DNA聚合酶及原料等，借助于PCR仪可在体外实现DNA分子上特异基因所在片段的扩增。 PCR仪 什么是基因文库 基因文库指的是将生物的DNA分子用一定的方法制成若干片段，并将这些片段导入酵母菌等；其中含有该生物所有DNA片段的酵母菌全体即构成该生物的基因文库，文库中含有该生物所有的基因片段。 DNA DNA片段化 片段化的DNA插入载体 导入宿主菌 宿主菌自身的DNA 构建基因文库 含三色堇蓝色色素基因的DNA片段 单独的基因缺乏控制复制起始的序列（一段核酸序列），无法在细胞内复制。 解决办法：让目的基因插入玫瑰细胞的自身DNA中间，获取复制起始序列。（2分） 目的基因需要能随着细胞分裂而_______（1分）并能分配到子细胞（即稳定存在）,同时还要能_______（1分）。 复制 表达 基因工程的工具——载体 作用：利于目的基因稳定存在于受体细胞中。 常见类型：质粒、病毒 质 粒 来源：细菌等 化学本质：双链DNA 形状： 位置： 数目： 所含基因： 拟核区之外 每个细菌中可有多个（可自主复制） 抗生素抗性基因等 小型环状 如何才能实现这种连接呢？ 第二环节：构建重组DNA 重组DNA是由载体和目的基因片段连接形成。重组质粒是其中的一类。 基因工程的工具——限制性核酸内切酶 5’????????GAATTC ????????3’ 3’????????CTTAAG ????????5’ 5’????????GGATCC ????????3’ 3’????????CCTAGG ????????5’ 5’????????GACGTC ????????3’ 3’????????CTGCAG ????????5’ 5’????????AAGCTT ????????3’ 3’????????TTCGAA ????????5’ 限制性核酸内切酶：识别和切割DNA分子内一小段特殊核苷酸序列的酶。 EcoRⅠ BamHⅠ AatⅡ HindⅢ 基因工程的工具——限制性核酸内切酶 5’????????GGGCCC ????????3’ 3’????????CCCGGG ????????5’ 5’????????GGGCCC ????????3’ 3’????????CCCGGG ????????5’ 酶Ⅰ和酶Ⅱ是同一种限制性核酸内切酶么？（1分） 酶Ⅰ 酶Ⅱ EcoRⅠ的作用： EcoRI的作用过程 粘性末端 粘性末端 水解________键，对____键的断裂无催化作用（1分）。 磷酸二酯 氢 EcoRI 课堂练习 （2分）下列关于限制性核酸内切酶的说法，正确的有 A.识别序列相同的限制性核酸内切酶是同一种酶 B.特定的限制性核酸内切酶只能识别特定