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第一章:显微镜的几个重要光学技术参数
在镜检时,人们总是希望能清晰而明亮的理想图象,这就需要显微镜的各项光学技术
参数达到一定的标准,并且要求在使用时,必须根据镜检的目的和实际情况来协调各参数
的关系。只有这样,才能充分发挥显微镜应有的性能,得到满意的镜检效果。
显微镜的光学技术参数包括:数值孔径、分辨率、放大率、焦深、视场宽度、工作距
离、覆盖差等。这些参数并不都是越高越好,它们之间是相互联系又相互制约的,在使用
时,应根据镜检的目的和实际情况来协调参数间的关系,但应以保证分辨率为准。
1. 数值孔径:(Numerical aperture)简写NA
数值孔径是判断物镜性能(分辨率,焦深和亮度)的关键要素,计算公式如下:
N.A.=n×Sin(u/2)
n = 试样与物镜之间介质的折射率(空气:n=1、油:n=1.515)
u:孔径角又称“镜口角”,是物镜光轴上的物体点与物镜前透镜的有效直径所形成的
角度,也是光轴与离物镜中心最远折射光形成的角度。孔径角越大,进入物镜的光通亮就
越大,它与物镜的有效直径成正比,与焦点的距离成反比。
空气的折射率为n=1,孔径角最大不能超过180度,否则会因为物镜工作距离等于零而
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无法工作。Sin(180/2)=1,所以空气介质的NA值小于1。
显微镜观察时,若想增大NA值,孔径角是无法增大的,唯一的办法是增大介质的折射
率n值。基于这一原理,就产生了水浸系物镜和油浸物镜,因介质的折射率n值大于1,NA
值就能大于1。
数值孔径最大值为1.4,这个数值在理论上和技术上都达到了极限。目前,有用折射率
高的溴萘作介质,溴萘的折射率为1.66,所以NA值可大于1.4。
这里必须指出,为了充分发挥物镜数值孔径的作用,在观察时,聚光镜的NA值应等于
或略大于物镜的NA值,数值孔径与其他技术参数有着密切的关系,它几乎决定和影响着其
他各项技术参数。它与分辨率成正比,与放大率成正比,与焦深成反比,NA值增大,视场
宽度与工作距离都会相应地变小。
2. 分辨率(Resolving power)
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分辨率又称“鉴别率”,“解像力”。是衡量显微镜性能的又一个重要技术参数。
显微镜的分辨率用公式表示为:d=l/NA
式中d为最小分辨距离;l为光线的波长;NA为物镜的数值孔径。可见物镜的
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