高效液相色谱仪检定规程.doc

深圳培训网 LC10AD型高效液相色谱仪检定规程 修订 日期 修订 单号 修订内容摘要 页次 版次 修订 审核 批准 2011/03/30 / 系统文件新制定 4 A/0 / / / 更多免费资料下载请进： 好好学习社区 批准： 审核： 编制： LC-10AD型高效液相色谱仪检定规程 适用范围 适用于岛津LC-10AD型高效液相色谱仪的检定。 职责 检验员：严格按照检定规程进行周期检定。 QC主管：监督检查检定规程执行情况。 检定项目和技术要求 输液系统 泵流量设定值误差：Ss＜±2%；流量稳定性误差：＜±2% 定性测量重复性误差（5次定量管进样）：RSD≤1.5% 定量测量重复性误差（5次定量管进样）：RSD≤1.5% 紫外检测器性能 可调波长紫外—可见光检测器波长示值误差：＜±2nm；重复性误差：＜±1nm 基线漂移：≤5×10-3（AU/h）；基线噪声：≤5×10-4(AU) 最小检定浓度（静态）：4×10-8g/ml（萘的甲醇溶液） 检定条件 环境温度为10～30℃，8小时内温度波动不超过±3℃，相对湿度低于65%。 电源电压：220±22V，电源频率：50±0.5Hz。 检定设备 秒表：分度值小于0.1s。 分析天平：最大称量200g，最小分度值0.1mg。 容量瓶 微量注射器 标准物质和试剂 检定方法 泵流量设定值误差Ss、流量稳定性误差SR的检定。 将仪器的输液系统、进样器、色谱柱和检测器联接好，以甲醇为液动相，按表1设定流量，待流速稳定后，在流动相排出口用事先清洗称重过的容量瓶收集流动相，同时用秒表计时，准确地收集10～25分钟，称重，按下式计算Ss和SR。 Ss=（Fm—Fs）/Fs×100% SR=（Fmax—Fmin）/F×100% 式中Ss为流量设定值误差（%）； Fm=（W2—W1）ρt·t为流量实测值； W2：容量瓶+流动相的重量（g）； W1：容量瓶的重量（g）； Fs：流量设定值（ml/min）； ρt：实验温度下流动相的密度（g/cm3）； t：收集流动相的时间（min）； SR：流量稳定性误差（%）； Fmax：同一组测量中流量最大值（ml/min）； Fmin：同一组测量中流量最小值（ml/min）； F：同一组测量中的算术平均值（ml/min）。 表1 Ss、SR的检定 流量设定值（ml/min） 0.5 1.0 1.5 测量次数 3 3 3 收集流动相时间（min） 25 15 10 允许 误差 Ss 3% 2% 2% SR 3% 2% 2% 定性、定量测量重复性的检定 将仪器联接好，使之处于正常工作状态，用进样阀的定量管注入适当的标准溶液（萘或联苯）或稳定的待分析样品溶液，记录保留时间和峰面积，连续测量5次，按下式计算相对标准偏差RSD。 RSD= [Σ（Xi—X）2]/（n—1） ×1/X×100% 式中，RSD为定性、定量重复性的相对标准偏差； Xi为第i次测得的保留时间或峰面积； X为n次测量结果的算术平均值； i为测量序号； n这测量次数。 紫外检测器性能 可调波长紫外-可见光检测器波长示值误差和重复性误差的检定 将检测器与记录仪联好，接通电源稳定后，先将检测波长调至235nm，用甲醇用流动相，流速1.0ml/min，用进样器注入重铬酸钾的硫酸溶液（取120℃干燥至恒重的基准重铬酸钾约60mg，精密称定，用0.005mol/L硫酸溶液溶解并稀释至1000ml，摇匀，即得）20ul，待出峰时立即停泵，改用波长扫描方式，得到重铬酸钾在紫外-可见光区的吸收曲线，记录其在235nm、257nm、313nm、350nm附近波长处的最大或最小吸收波长，分别找出各点最大或最小波长与标准波长之差即为波长示值误差；重复测定3次，各点最小与最大值之差即为波长重复性误差。 基线漂移和基线噪声的检定 将仪器各部分联接好，紫外检测器波长调到254nm，流动相为100%甲醇，流速为1.0ml/min，吸收度范围选择最灵敏档，开机，待基线稳定后，记录基线30-40分钟，计算基线漂移和噪声。 最小检测浓度 在静态条件下，用进样器注入4×10-8g/ml萘的甲醇溶液，样品峰高应大于或等于两倍基线噪声峰高，按下式计算最小检测浓度。 Cl=2×HN×C /H 式中，Cl：最小检测浓度（g/ml）； HN：噪声峰高（记录仪器数或实测高度cm）； C：样品浓度（g/ml）； H：样品峰高（记录仪器数或实测高度cm）。 检定结果处理和检定周期 检定结果全部项目均符合技术要求者，判为合格，方可使用。若个别部件、某一指标达不到要求，确难以维修而又不影响定性、定量结果准确性者，可作为准用品。 液相色谱仪的检定周期为两年，若更换部件或对仪器性能有怀疑时，应随时检定，并记录检