p53抗体试剂（免疫组织化学法）说明书-福州迈新生物技术.PDFVIP

p53 抗体试剂 （免疫组织化学法）说明书 说明书编号：40010b 产品编号：Kit-0010 【产品名称】 通用名称：p53 抗体试剂 （免疫组织化学法） 英文名称：p53 （DO-7 ） 【包装规格】 3ml/瓶、6ml/瓶。 【预期用途】 本抗体试剂用于福尔马林固定、石蜡包埋的人体组织切片，细胞中p53 蛋白抗原的定性 检测。 本抗体试剂可用于宫颈癌、食管癌、胃癌、结肠癌肿瘤细胞中p53 的检测。阳性细胞中 抗原定位为细胞核。对任何阳性或阴性结果的解读，应由病理医生结合病理形态学、临床表 现及其它检测方法进行，不作为单独的诊断指标。 【检测原理】 利用免疫学抗原抗体分子由于结构的互补和彼此亲和性所发生特异性结合原理，并通过 氧化还原化学反应使标记抗体的酶显色剂显色来确定组织细胞内抗原，对其进行定位、定性。 首先是联结鼠抗人p53 免疫组化单克隆抗体和组织上的p53 抗原；第二是酶标羊抗小鼠/兔 IgG 聚合物识别已经连接上的p53 抗体；第三，加入底物，聚合物上的辣根过氧化物酶部分 可以催化 DAB 显色液中的 H O 分解，使联苯胺氧化变成联苯亚胺，使组织切片中抗原位 2 2 点上出现黄色或棕黄色着色；最后对样本进行复染和封片。通过显微镜观测显色情况，推断 组织切片上p53 的存在位点和情况。为了质量控制，建议使用福尔马林固定石蜡包埋的人类 结肠管状腺癌组织切片作为阳性对照。 本抗体试剂克隆号为：DO-7 ；细胞染色定位为细胞核；抗原修复必须采用柠檬酸缓冲 液高压法。 【主要组成成份】 鼠抗人p53 免疫组化单克隆抗体 （IgG2b / kappa ；来源：小鼠腹水；克隆号：DO-7 ） 未提供的迈新配套材料如下： 迈新DAB 染色液（聚合物法）（迈新产品编号：Kit-0014，内含：内源性过氧化物酶阻 断剂、酶标羊抗小鼠/兔IgG 聚合物、稳定型DAB 缓冲液、稳定型DAB 底物、稳定型DAB 色原、DAB 显色液配制管）； PBS 磷酸盐缓冲液（粉剂）（迈新产品编号：PBS-0060/0061 ）； 柠檬酸组织抗原修复液（100×）（迈新产品编号：MVS-0100/0101 ）； 苏木素体细胞染色液 （迈新产品编号：CTS-1099/1097/1090/1091）； 空白对照试剂 （可采用迈新抗体稀释液，迈新产品编号：ABD-0030 ） 其他未提供材料： 阳性对照片（结肠管状腺癌）、二甲苯 、乙醇（无水、95%、85% ）、蒸馏水、中性树 胶。 【储存条件及有效期】 2~8℃避光保存，禁止冻存。有效期为12 个月。 使用时，采取即拿即用的原则，在每次使用后，应立即放回2~8℃的冰柜中进行保存。 【样本要求】 新鲜活检或外科样本组织，中性福尔马林固定，固定时间8~24小时，参照病理技术规范 要求取材、脱水、石蜡包埋并制成蜡块。蜡块在常温条件下保存有效期5年。 组织切片厚度为3~5 μm 黏附在聚赖氨酸玻片上，轻拍切片架并用吸湿纸吸取组织切片 1 中的水滴，再放入56~60°C 恒温箱中加热两个小时后，从恒温箱中移出放置在室温下冷却。 如果切片在室温下 （15~28℃）保存，为了良好地重现组织中抗原分布情况，要在7 天内完 成检测。 【检测方法】 1 检测所需仪器、设备： 移液器、免疫组化油笔、1000w 可调电磁炉、计时器、孵育盒、染色架、盖玻片、不 锈钢压力锅、光学显微镜 （40×~200×）、洗瓶。 2 溶液配制： PBS溶液、柠檬酸组织抗原修复液以及DAB显色液的配制参见各产品说明书。 3 试验温度条件：15℃~28 ℃ 4 试验步骤： a ） 脱蜡和水化 石蜡切片置于新鲜的二甲苯中，浸泡15分钟×2次； 去除多余的液体后，置无水乙醇中，浸泡3分钟×2次； 去除多余的液体后，置